الأسباب التي تجعل البكتيريا تحتاج إلى إصلاح قبل تلطيخ في تجارب المجهر:
خلايا القتل أسهل على الأصباغ للبقع.
اجعل البكتيريا تلتصق بالشرائح الزجاجية ولا يتم غسلها بسهولة بالماء.
عند التثبيت ، من الضروري أن يجف الهواء ببطء. إذا كان من الضروري تسريع العملية ، فيمكنك تجفيفها عدة مرات من مسافة فوق اللهب من مصباح الكحول. لا تجفف الشريحة الزجاجية حتى تسخن ، وإلا فقد يضر شكل الحياة البكتيرية
تلطيخ الجرام والمراقبة المجهرية للبكتيريا
المبدأ التجريبي
مبدأ تلطيخ الجرام: تفاعلات مختلفة من البكتيريا لتلطيخ الجرام ناتجة عن الاختلافات في تكوين وهيكل جدران الخلايا. يتكون جدار الخلية من البكتيريا الإيجابية للجرام بشكل أساسي من شبكة من الببتيدوغليكان. عند التعامل مع الإيثانول ، يؤدي الجفاف إلى انخفاض في حجم المسام ونفاذية بنية الشبكة ، مما يجعل من الصعب على مجمع اليود البنفسجي الكريستالي غسله والاحتفاظ به داخل الخلية. بعد إزالة اللون ومكافحة الملاءمة ، لا يزال يتم الاحتفاظ باللون الأرجواني الأرجواني للصبغة الأولية. طبقة الببتيدوغليكان على جدار الخلية من البكتيريا السلبية غرام رقيقة ولها محتوى شحمي عالي. لذلك ، عند إزالة اللون ، يتم إذابة الدهون في الإيثانول (أو الأسيتون) ، مما يزيد من نفاذية جدار الخلية ويسهل غسل مجمع اليود البنفسجي الكريستالي. بعد مضادة مع مضاد ، يتم تلوين الخلايا باللون الأحمر للمضاد. مبدأ التصوير المجهر: تستخدم المجاهر البصرية العادية الحديثة مجموعتين من أنظمة العدسة ، وعدسة العدسة وعدسة موضوعية ، للتكبير والصورة ، لذلك غالبًا ما يشار إليها باسم المجاهر المركبة. في النظام البصري للمجهر ، يكون أداء العدسة الهدف هو الأكثر أهمية ، ويكون تكبير عدسة الزيت هو الأعلى ، وهو الأكثر أهمية للبحث الميكروبيولوجي. إن إضافة زيت العدسة بين الشريحة الزجاجية والعدسة هي زيادة سطوع الإضاءة وتعزيز دقة المجهر. إن استخدام الزيت بدلاً من الهواء كوسيط لانتشار الضوء يقلل من الانكسار أو الانعكاس الكلي للضوء ، مما يجعل الصورة الملحوظة أكثر وضوحًا.
