المجهر البيولوجي فيما يتعلق بحجم كتل الأنسجة
الفحص المجهري البيولوجي حتى الآن، يعد التثبيت البارد والتقسيم المجمد فائق الدقة والتجفيف بالتجميد من الطرق الروتينية للقسم الدقيق للأشعة السينية للأنسجة والخلايا. وفيما يلي تفاصيل هذه الطريقة:
المجاهر البيولوجية. بالنسبة للمجاهر ذات المكثف، يمكن تحريك المكثف لأعلى ولأسفل لتحقيق سطوع معتدل. بالإضافة إلى ذلك، يمكن تغيير فتحة الثنائيات الباعثة للضوء المتغيرة لتحقيق سطوع معتدل 9b. إذا كان الضوء ساطعًا، يمكن رفع المكثف بشكل مناسب ويمكن تكبير فتحة الضوء المتغير بشكل مناسب. إذا كان الضوء قويًا جدًا، فيمكن خفض المكثف بشكل مناسب ويمكن تقليل فتحة شعاع الضوء المتقاطع بشكل مناسب. إذا كنت لا تزال تشعر بالإبهار في ظل هذا الوضع، يمكنك اختيار الفلتر المناسب ووضعه على الحامل الموجود أسفل المكثف. بهذه الطريقة يمكنك الحصول على السطوع الذي يرضيك. بالطبع، يستغرق الأمر فترة معينة من التدريب لاكتساب الخبرة في ضبط الوضع العلوي والسفلي للمكثف لتحقيق حجم فتحة متغير واختيار المرشحات المناسبة.
هناك مسألة مهمة جدًا في الفحص المجهري البيولوجي وهي أنه أثناء عملية جمع الخلايا وفصلها، بعد التجفيف بالتجميد وتضمين الراتنج (FD)، وبعد تجميد الكريات الرقيقة جدًا، وبعد التجفيف بالتجميد، يجب أن يكون محتوى العنصر البالغ 65 عنصرًا في كل جزء يتم تحليلها بعناية فائقة، ولا تلحق أي ضرر بالخلايا المراد تحليلها. لأن تحليل المنطقة الدقيقة بالأشعة السينية لا يتضمن العديد من الخطوات فحسب، بل يكلف أيضًا الكثير. إذا كانت الخلايا التي تم تحليلها، بعد وقت طويل وخطوات متعددة، عبارة عن خلايا تالفة أو خلايا ميتة، فسيكون من المؤسف استخلاص استنتاجات خاطئة. على سبيل المثال، الخلايا العضلية القلبية المعزولة بعد علاج الكولاجيناز لها شكلان، أحدهما طويل على شكل قضيب والآخر مستدير. هذه الأخيرة هي الخلايا الميتة التي تضررت أثناء عزل الخلية.
الفحص المجهري البيولوجي يختلف محتوى وتوزيع الشوارد في هذين النوعين من الخلايا اختلافًا كبيرًا. Na مرتفع جدًا وK منخفض جدًا في الخلايا العضلية القلبية المستديرة، وتركيز Ca في الفروع الخطية مرتفع جدًا. بعد التحقق من طرق التحليل الأخرى، ثبت أن ارتفاع الصوديوم وانخفاض البوتاسيوم في الخلايا المستديرة وارتفاع الكالسيوم في الميتوكوندريا كانا نتيجة للضرر الذي لحق بغشاء الخلية أثناء عملية فصل الخلية. غالبًا ما تكون طريقة التثبيت البارد للخلايا والأنسجة هي إخمادها وتثبيتها أولاً، ثم تخزينها في النيتروجين السائل. التبريد والتثبيت مهمان جدًا لتأثير الحفظ. الخلايا الحية أو الأنسجة الطازجة غنية بالمياه. عند التبريد، يتم أولاً تجميد وتثبيت أجزاء الخلايا أو الأنسجة التي تكون على اتصال مباشر مع الكريوجين (خاصة عند التبريد بالنيتروجين السائل)، وبالتالي تشكل "قشرة"، مما يعيق سحق الجزء المركزي من الخلايا. والثابتة الباردة. لذلك، عند إجراء تحليل المنطقة الدقيقة على شكل X، غالبًا ما يتبين وجود بلورات ثلجية في وسط الخلايا الأكبر حجمًا. من أجل منع حدوث ذلك، يتم استخدام مادة ذات نقطة انصهار أعلى من النيتروجين السائل ولكنها ذات جفاف أقل تبلغ -806c كمبرد مسحوق. هناك العديد من هذه المواد، لكن أسهلها وأرخصها هو البروبان المركز (درجة الغليان - 42.120c، نقطة الانصهار - 187.10c، الوزن الجزيئي 44.1)، كما أن معدل التبريد هو الأسرع أيضًا. لكن عيبه أنه قابل للاشتعال.
يمكن للمجهر البيولوجي وضع الألياف العضلية في إطار خاص. عندما يصل تقلص الألياف العضلية إلى مرحلة معينة ويحتاج إلى إصلاح، يتم تشغيل الفوهة على الفور لرش البروبان السائل على الألياف العضلية لإرواءها وإصلاحها. ثم يتم إخراج ألياف العضلات مع الإطار ووضعها في النيتروجين السائل. إذا كانت خلايا الدم أو الخلايا المنفصلة ثابتة، قم أولاً بالطرد المركزي بسرعة منخفضة لتركيز الخلايا، ثم انقل الخلايا إلى أنبوب فضي صغير ذي موصلية حرارية جيدة، ثم ضع الأنبوب في البروبان السائل وقم بتجميده لإصلاحه. عند تثبيت بنكرياس الجرذ في مختبر هول، قم أولاً بالتبريد المسبق للكتلتين الفولاذيتين بالهيليوم السائل (أو النيتروجين السائل)، ثم قم بتثبيت الكتلتين النحاسيتين بالملقط، ثم ضعهما قبل البنكرياس وبعده لإرواء الغدة الرحمية وإصلاحها. . يمكن إخماد الأنسجة أو الخلايا وتثبيتها ثم نقلها إلى النيتروجين السائل للتخزين على المدى الطويل.
