لماذا يكون تكبير العدسة الزيتية أكبر من تكبير العدسة الشيئية العادية؟
أسباب ضرورة إصلاح البكتيريا قبل صبغها في التجارب الميكروبيولوجية:
1: قتل الخلايا وجعل الصبغة سهلة التلوين.
ثانيًا: جعل البكتيريا تلتصق بالشريحة الزجاجية ولا يمكن غسلها بسهولة بالماء.
عند التثبيت، جفف ببطء. إذا كنت تريد حقا تسريع العملية، فيمكنك تجفيفها عدة مرات على مسافة فوق لهب مصباح الكحول. لا تجفف الزجاج حتى يسخن، وإلا فقد يؤدي ذلك إلى تدمير شكل الحياة البكتيري.
صبغة جرام والمراقبة المجهرية للبكتيريا
المبدأ التجريبي
مبدأ تلطيخ الجرام: إن التفاعلات المختلفة للبكتيريا مع تلطيخ الجرام ترجع إلى اختلاف تركيب وبنية جدران خلاياها. جدار الخلية للبكتيريا إيجابية الجرام هو في الأساس شبكة من الببتيدوغليكان. عند معالجته بالإيثانول، يصبح حجم مسام بنية الشبكة أصغر بسبب الجفاف، وتقل النفاذية، مما يتسبب في تكوين مركب اليود البنفسجي البلوري. لا يتم التخلص من المادة بسهولة وتبقى في الخلايا. بعد إزالة اللون والصبغ المضاد، يظل اللون الأزرق البنفسجي للصبغة الأولية محتفظًا به. طبقة الببتيدوغليكان الموجودة في جدار الخلية من البكتيريا سالبة الجرام رقيقة وتحتوي على نسبة عالية من الدهون. لذلك، أثناء إزالة اللون، يتم إذابة الدهون بواسطة الإيثانول (أو الأسيتون)، وتزداد نفاذية جدار الخلية، مما يجعل مجمع اليود البنفسجي البلوري من السهل نسبيًا إزالته. بعد الصبغ المضاد بالبقع المضادة، يتم تلوين الخلايا باللون الأحمر للبقع المضادة. مبدأ التصوير المجهري: تستخدم المجاهر الضوئية العادية الحديثة نظامين من العدسات، العدسات العينية والعدسات الشيئية، لتكبير الصور، لذلك يطلق عليها غالبًا المجاهر المركبة. في النظام البصري للمجهر، يكون أداء العدسة الشيئية هو الأكثر أهمية. تتمتع العدسة الزيتية بأكبر قدر من التكبير وهي الأكثر أهمية في الأبحاث الميكروبيولوجية. الغرض الرئيسي من إضافة قطرات من زيت العدسة بين الشريحة والعدسة هو زيادة سطوع الإضاءة وزيادة دقة المجهر. إن استخدام الزيت بدلاً من الهواء كوسيلة لانتشار الضوء يقلل من انكسار الضوء أو انعكاسه الكلي، مما يجعل الصورة المرصودة أكثر وضوحًا.
ابحث عن المستعمرات البكتيرية المراد ملاحظتها تحت مجهر منخفض التكبير (استمر في تحريك الشريحة، إذا شعرت بظل أحمر، توقف فورًا، اضبط التكبير، إذا لم تكن مستعمرة، واصل النظر)، ارفع أسطوانة العدسة ، ثم انتقل إلى العدسة الزيتية. أضف قطرة من زيت الأرز إلى منطقة العينة، واستخدم أداة الضبط الخشنة لخفض أسطوانة العدسة بعناية بحيث تكون العدسة الزيتية مغمورة في زيت العدسة وتلامس العينة تقريبًا. ارفع المكثف إلى أعلى موضع وافتح الفتحة. استخدم أداة الضبط الخشنة لرفع أسطوانة العدسة ببطء حتى تظهر صورة الكائن في مجال الرؤية واستخدم أداة الضبط الدقيقة لجعلها واضحة وفي نطاق التركيز.
