يتضمن الهيكل الخاص للمجهر الفلوري ما يلي:
(ط) نظام تصفية الألوان
يعد مرشح الألوان جزءًا مهمًا من المجهر الفلوري، ومكوناته الأساسية هي مرشح ضوء الإثارة (مرشح الحاجز الأول)، ومرشح ضوء الانبعاث (مرشح الحاجز الثاني) وتركيبة نصف شفافة ونصف مضادة للمرشح (مرآة تقسيم الشعاع). . الشركات المصنعة المختلفة لنماذج مرشح الألوان، غالبًا ما يكون الاسم غير موحد.
1. مرشح ضوء الإثارة ومرشح ضوء الانبعاث: وفقًا لمصدر الضوء وخصائص التألق، عادةً ما يتم اختيار الأنواع الثلاثة التالية من المطابقة، لتوفير نطاق معين من الطول الموجي لضوء الإثارة، وجعل عينة الإثارة من الفلورسنت من خلال العدسة إلى التصوير.
إثارة الأشعة فوق البنفسجية: يسمح مرشح ضوء الإثارة بنقل ضوء الأشعة فوق البنفسجية ويمنع مرور الضوء المرئي فوق 400 نانومتر. يسمح مرشح الانبعاث المقابل بمرور الضوء الأزرق، الذي يظهر باللون الأزرق في مجال الرؤية، على سبيل المثال لتلطيخ DAPI.
إثارة الضوء الأزرق: يسمح مرشح الضوء المثير للضوء الأزرق بالمرور، مما يحجب الأطوال الموجية الأخرى للضوء. يسمح مرشح الانبعاثات المقابل بمرور الضوء الأخضر، على سبيل المثال لعلامات تلطيخ GFP.
الإثارة الخضراء: يسمح مرشح الإثارة للضوء الأخضر بالمرور، مما يحجب الأطوال الموجية الأخرى. عادةً ما يسمح مرشح الانبعاث المقابل للضوء الأحمر بالمرور، على سبيل المثال، تلوين رودامين.
2. مرشح نصف شفاف ونصف عاكس: يتمثل دوره في منع إثارة الضوء من خلال الانعكاس تمامًا؛ ومن خلال نطاق الطول الموجي المقابل للضوء المنبعث. يتوافق نموذجها مع إثارة مرشحات الضوء وانبعاث مرشحات الضوء.
(ب) العدسة الموضوعية والعدسة
يمكن تطبيق مجموعة متنوعة من العدسات الشيئية، ولكن * اختيار جيد للعدسة الموضوعية المتناظرة واللونية، نظرًا لتألقها الذاتي، فهي صغيرة جدًا وخصائص نقل الضوء (نطاق الطول الموجي) مناسبة للتألق. نظرًا لأن سطوع الصورة في مجال رؤية المجهر يتناسب مع مربع معدل كمامة الهدف ويتناسب عكسيًا مع تكبيرها، لذلك من أجل تحسين سطوع صورة التألق، يجب أن يكون الهدف ذو معدل كمامة كبير يستخدم. خاصة بالنسبة للعينات الفلورية ليست قوية بما فيه الكفاية، يجب استخدام معدل فم كبير، وهدف نقل الضوء العالي، مع أدنى مستوى ممكن مع العدسة.
(ج) الأجهزة البصرية الأخرى
العاكس، طبقته العاكسة مطلية بالألمنيوم بشكل عام، لأن الألومنيوم على الأشعة فوق البنفسجية وامتصاص الضوء المرئي للمنطقة الزرقاء البنفسجية أقل، مما يعكس ما يصل إلى 90% أو أكثر (في حين أن انعكاس الفضة هو 70%) فقط. تستخدم العاكسات المسطحة بشكل عام. مرآة كشاف، مصممة ومصنعة خصيصًا لمرآة كشاف المجهر الفلوري المصنوعة من زجاج الكوارتز أو أي زجاج آخر شفاف للأشعة فوق البنفسجية. جهاز سقوط الضوء، بالإضافة إلى وظيفة مصدر الضوء المنقول، أكثر ملاءمة للعينات غير الشفافة والشفافة، مثل الفيلم السميك وغشاء المرشح والمستعمرة وزراعة الأنسجة وعينات أخرى للمراقبة المباشرة. في السنوات الأخيرة، تم تطوير نوع جديد من المجهر الفلوري باستخدام جهاز الضوء الساقط، يسمى المجهر الفلوري الساقط.
(د) مصدر الضوء
في الوقت الحاضر، يتم استخدام مصباح الزئبق عالي الضغط 50 أو 100 واط كمصدر للضوء. يعمل تفريغ القطبين، الناتج عن تبخر الزئبق، على ارتفاع ضغط الهواء بسرعة (تستغرق هذه العملية عمومًا حوالي 5 إلى 15 دقيقة)، وفي عملية انبعاث الكميات الضوئية، يكون الطول الموجي للضوء المنطلق كافيًا للإثارة جميع أنواع المواد الفلورية، لذلك، يتم استخدام المجهر الفلوري بشكل شائع.
تتمتع مصابيح الزئبق بعمر خدمة قصير نسبيًا، عادة 200 ساعة، واستجابة لهذه القيود على عمر الخدمة، في السنوات الأخيرة، تم استخدام مصدر ضوء الفلورسنت الجديد، X-Cite، على نطاق واسع لعمر المصباح الطويل الذي يصل إلى 2000 ساعة واستخدامه المرن. - لا حاجة للتسخين المسبق، وهو جاهز للاستخدام بمجرد إخراجه من الصندوق.
