الفرق بين المجهر الفلورسنت والليزر متحد البؤر
المجهر الفلوري
1. المجهر الفلوري هو جهاز يستخدم الضوء فوق البنفسجي كمصدر للضوء لإضاءة الكائن الذي يتم اختباره، مما يؤدي إلى انبعاث الفلورة، ثم مراقبة شكل وموضع الكائن تحت المجهر. يُستخدم المجهر الفلوري لدراسة امتصاص المواد ونقلها وتوزيعها وتوطينها داخل الخلايا. يمكن لبعض المواد الموجودة في الخلايا، مثل الكلوروفيل، أن تصدر مضانًا بعد تعرضها للأشعة فوق البنفسجية؛ قد لا تبعث بعض المواد نفسها مضانًا، ولكن إذا كانت ملطخة بأصباغ فلورسنت أو أجسام مضادة فلورسنت، فيمكنها أيضًا أن تنبعث منها مضان تحت الأشعة فوق البنفسجية. يعد الفحص المجهري الفلوري أحد أدوات البحث النوعي والكمي حول هذه المواد.
2. مبدأ المجهر الفلوري:
(أ) مصدر الضوء: يصدر مصدر الضوء ضوءًا بأطوال موجية مختلفة (من الأشعة فوق البنفسجية إلى الأشعة تحت الحمراء).
(ب) مصدر ضوء مرشح الإثارة: نقل الضوء ذو الطول الموجي المحدد الذي يمكن أن ينتج مضانًا في العينة، مع حجب الضوء الذي لا فائدة منه في مضان الإثارة.
(ج) عينات الفلورسنت: ملطخة عموما بأصباغ الفلورسنت.
(د) مرشح الحجب: ينقل الفلورة بشكل انتقائي عن طريق حجب ضوء الإثارة الذي لم تمتصه العينة، كما يتم نقل بعض الأطوال الموجية بشكل انتقائي في الفلورة. مجهر يستخدم الأشعة فوق البنفسجية كمصدر للضوء لإصدار الفلورسنت من الجسم المشعع. تم تجميع المجهر الإلكتروني لأول مرة بواسطة كنور وهاروسكا في برلين بألمانيا في عام 1931. يستخدم هذا النوع من المجهر شعاع إلكتروني عالي السرعة بدلاً من شعاع الضوء. نظرًا للطول الموجي الأقصر بكثير لتدفق الإلكترون مقارنة بموجات الضوء، يمكن أن يصل تكبير المجهر الإلكتروني إلى 800000 مرة، بحد أدنى للدقة يبلغ 0.2 نانومتر. يسمح المجهر الإلكتروني الماسح، الذي بدأ استخدامه في عام 1963، للناس برؤية الهياكل الصغيرة الموجودة على سطح الأشياء.
3. نطاق التطبيق: يستخدم لتكبير صور الأشياء الصغيرة. يستخدم بشكل عام لمراقبة الأحياء والطب والجزيئات المجهرية وما إلى ذلك.
مجهر متحد البؤر
1. يضيف المجهر متحد البؤر عدسة شبه عاكسة إلى مسار الضوء المنعكس، مما يؤدي إلى ثني الضوء المنعكس الذي مر بالفعل عبر العدسة في اتجاهات أخرى. يوجد حاجز به ثقب في النقطة المحورية، ويقع الثقب الصغير في النقطة المحورية. يوجد خلف الحاجز أنبوب مضاعف ضوئي. يمكن تخيل أن الضوء المنعكس قبل وبعد نقطة بؤرة ضوء الكشف لا يمكن تركيزه على الثقب الصغير من خلال هذا النظام البؤري وسيتم حظره بواسطة الحاجز. لذا فإن مقياس الضوء يقيس شدة الضوء المنعكس عند النقطة البؤرية.
2. المبدأ: تستخدم المجاهر الضوئية التقليدية مصادر الضوء الميدانية، وسوف تتأثر صورة كل نقطة على العينة بالحيود أو الضوء المتناثر من النقاط المجاورة؛ يستخدم المجهر متحد البؤر المسح بالليزر شعاع الليزر لتشكيل مصدر ضوء نقطي من خلال ثقب صغير مضاء لمسح كل نقطة في المستوى البؤري للعينة. يتم تصوير النقطة المضيئة في العينة عند ثقب الكشف، ويتم استقبالها نقطة بنقطة أو خط بواسطة أنبوب مضاعف ضوئي (PMT) أو جهاز اقتران كهروحراري (cCCD) بعد ثقب الكشف، مما يؤدي بسرعة إلى تكوين صورة فلورسنت على شاشة الكمبيوتر شاشة. يتم ربط ثقب الإضاءة وثقب الكشف بالنسبة إلى المستوى البؤري للعدسة الموضوعية. وتركز النقاط الموجودة على المستوى البؤري في وقت واحد على ثقب الإضاءة وثقب الانبعاث، ولن يتم تصوير النقاط خارج المستوى البؤري عند ثقب الكشف. وينتج عن ذلك صورة متحد البؤر تمثل المقطع العرضي البصري للعينة، مما يتغلب على عيب الصور غير الواضحة في الفحص المجهري التقليدي.
3. مجالات التطبيق: تشمل الطب، أبحاث الحيوان والنبات، الكيمياء الحيوية، علم الجراثيم، بيولوجيا الخلية، الأنسجة والأجنة، علوم الأغذية، علم الوراثة، علم الصيدلة، علم وظائف الأعضاء، البصريات، علم الأمراض، علم النبات، علم الأعصاب، علم الأحياء البحرية، علم المواد، العلوم الإلكترونية، الميكانيكا وجيولوجيا البترول وعلم المعادن.
