الاستخدام الصحيح للمجهر الفلوري المقلوب
المجهر الفلوري المقلوب هو مجهر متعدد الوظائف يستخدم في مجال أبحاث العلوم البيولوجية المتطورة. هيكلها معقد ومكلف. لذلك، لكي يتمكن طلاب الدراسات العليا في الطب من إتقان معايير التشغيل والاستخدام للمجهر الفلوري المقلوب بشكل صحيح، يحتاج المعلمون أولاً إلى تدريس المعرفة الأساسية للمجهر الفلوري المقلوب قبل توضيح التشغيل الفعلي للمجهر الفلوري المقلوب. يجب عليهم تقديم الهيكل والمبدأ والوظيفة وطرق الاستخدام الأساسية للمجهر الفلوري المقلوب، ومن ثم توضيح الوظائف المختلفة لعينات مختلفة في عمليات استخدام محددة، مما يجعل تشغيل واستخدام المجهر الفلوري المقلوب موحدًا تدريجيًا لطلاب الدراسات العليا في الطب.
1. الاستخدام الصحيح للملاحظة البصرية. إحدى وظائف المجهر الفلوري المقلوب هي المراقبة في مجال رؤية مشرق. مبدأها الأساسي هو تحقيق التصوير في خلفية مشرقة بناءً على امتصاص الضوء المختلف لكل جزء من العينة بعد إضاءته بالضوء. إنها مناسبة بشكل أساسي لمراقبة الخلايا الملطخة أو الملونة، وشرائح الأنسجة، والعينات الأخرى.
2. الاستخدام الصحيح للملاحظة التفاضلية. الوظيفة الثانية للمجهر الفلوري المقلوب هي ملاحظة فرق الطور. مبدأها الأساسي هو تحويل اختلاف المسار البصري لأجزاء مختلفة من العينة إلى فرق في السعة، والمراقبة من خلال هدف فرق الطور باستخدام لوحة الطور وضوء كشاف بفتحة دائرية. إنها مناسبة بشكل أساسي لمراقبة الخلايا الحية أو شرائح الأنسجة غير الملوثة. في عملية التدريس التجريبي، بالإضافة إلى توجيه طلاب الدراسات العليا في الطب بشكل صحيح لمتابعة طرق التشغيل الأساسية لمراقبة فرق الطور، من المهم إرشادهم لفهم العينات وإتقانها باستخدام مراقبة فرق الطور. بالنسبة لهم، الطريقة الأكثر استخدامًا في البحث العلمي المستقبلي هي المراقبة المجهرية للخلايا المزروعة. أولاً، لاختيار معدات الخلايا، يوصى عمومًا باستخدام أطباق الثقافة والأطباق والزجاجات المصنوعة من الزجاج والمواد البلاستيكية. وهي في الغالب عديمة اللون وشفافة، ويمكن ملاحظتها مباشرة تحت المجهر الفلوري المقلوب دون الحاجة إلى سكب سائل الخلية أو الخضوع لعلاجات أخرى. ثانيا، أثناء المراقبة المجهرية، لا تفتح غطاء المعدات عرضا لتجنب تلويث الخلايا. أخيرًا، بالنسبة للمشغلين، يجب ارتداء القفازات والأقنعة والمعاطف البيضاء ليس فقط لحماية صحتهم ولكن أيضًا لمنع تلوث الخلايا.
3. الاستخدام الصحيح لمراقبة مضان. الوظيفة الثالثة للمجهر الفلوري المقلوب هي ملاحظة الفلورة. مبدأها الأساسي هو استخدام ضوء الإثارة لإثارة العينة لإنتاج الفلورسنت، وبالتالي تحقيق مراقبة الشكل وتحديد موضع العينة. إنها مناسبة بشكل أساسي لمراقبة العينات ذات العلامات الفلورية. تعد مراقبة التألق وظيفة مهمة في الفحص المجهري التألقي المقلوب، مع ملحقات باهظة الثمن واستخدام خاص. من أجل أن يتقن طلاب الدراسات العليا في الطب بشكل صحيح معايير التشغيل لمراقبة التألق، لا يقوم المعلمون بتعليمهم طرق التشغيل الأساسية فحسب، بل الأهم من ذلك، تعليمهم تفردها. أولاً، في تحضير العينات، يجب أن يكون سطح الشريحة وزجاج الغطاء أملسًا ويجب أن يكون السمك مناسبًا (يجب أن تكون الشريحة بين 0.8 مم و1.2 مم، ويجب أن يكون زجاج الغطاء حوالي {{5 }}.17 ملم)؛ يجب أن يكون للعينة سمك مناسب مع تجنب تداخل الخلايا أو إخفاء الشوائب؛ يجب أن يستخدم عامل الختم خليطًا متساويًا من الجلسرين والكربونات العازلة (0.5mol/L pH 9.0-9.5). ثانيا، قبل مراقبة الفلورسنت، يجب إطفاء الأضواء الموجودة في الغرفة والضوء الأبيض للمجهر الفلوري المقلوب للتأكد من وجودهما في بيئة غرفة مظلمة. أخيرًا، في مراقبة التألق، يجب التحكم بشكل صارم في وقت المراقبة، بشكل عام 1-2 ساعة في كل مرة، وإلا فسوف يتحلل التألق ويختفي؛ عند ضبط مصدر الضوء، يجب ارتداء نظارات واقية لتجنب تلف الأشعة فوق البنفسجية للنظارات.
4. الاستخدام الصحيح لالتقاط الصور. في البحث العلمي، ليس مطلوبًا فقط أن يتمكن المجهر الفلوري المقلوب من تحقيق ملاحظات متعددة، ولكن أيضًا أن يتمكن المجهر الفلوري المقلوب من تحقيق التقاط الصور. يجمع نظام المجهر الفلوري المقلوب بين المجهر الضوئي والكمبيوتر من خلال التحويل الكهروضوئي، مما يسمح ليس فقط بالمراقبة المجهرية على العدسة، ولكن أيضًا بمراقبة الصور الديناميكية في الوقت الفعلي وتحريرها وتخزينها على الكمبيوتر.
