عدة مجاهر بصرية خاصة واختلافاتهم

عدة مجاهر بصرية خاصة واختلافاتهم

1 مجهر مجال مظلم
ليس لمجهر المجال المظلم وظيفة مراقبة البنية الدقيقة داخل الجسم ، ولكن يمكنه التمييز بين وجود الجسيمات وحركتها فوق 0. 004 ميكرومتر. لذلك ، غالبًا ما يستخدم لمراقبة بنية الخلايا الحية وحركة الجسيمات داخل الخلايا.

المبدأ الأساسي لمجهر المجال المظلم هو تأثير تيندال. عندما يمر شعاع من الضوء عبر غرفة مظلمة ، يمكن ملاحظة "مسار" غبار لامع في الهواء من اتجاه عمودي على الضوء الساقط. هذه الظاهرة هي تأثير تيندال.

بعد استبدال مجهر المجال المظلم بمكثف مجال مظلم على مجهر بصري عادي ، بسبب انسداد الهيكل المكافئ الداخلي للمكثف ، لا يمكن للضوء المشع على سطح الكائن المراد فحصه أن يدخل مباشرة إلى العدسة الشيئية و العدسة ، ويمكن للضوء المتناثر فقط المرور عبرها ، وبالتالي يكون مجال الرؤية مظلمًا.

الاستخدام الأساسي لمجهر Darkfield هو كما يلي:
1. قم بتركيب مكثف مجال مظلم (أو استخدم ورقًا أسود سميكًا لعمل درع ضوئي وضعه تحت مكثف مجهر عادي للحصول على تأثيرات المجال المظلم).

2. اختيار مصدر ضوء قوي ، عادة مع ضوء المجهر لمنع الضوء المباشر من دخول العدسة الشيئية.

3. أضف قطرة من زيت الأرز بين المكثف والشريحة الزجاجية لتجنب الانعكاس الكلي للضوء المضيء على المكثف ، وفشل الوصول إلى الكائن المراد فحصه وإضاءة المجال المظلم.

4. قم بإجراء ضبط المركز ، أي حرك المكثف أفقيًا بحيث يكون المحور البصري للمكثف والمحور البصري للميكروسكوب على خط مستقيم بشكل صارم. ارفع و اخفض المكثف ، قم بمحاذاة النقطة المحورية للمكثف (قمة الحزمة المخروطية في الشكل 1-2) للكائن المراد اختباره.

5. حدد العدسة الشيئية المقابلة للمكثف ، واضبط البعد البؤري ، واعمل وفقًا لطريقة المجهر العادي.

مجسم مجسم
مجاهر الاستريو ، والمعروفة أيضًا باسم المجاهر الصلبة أو تشريح المرايا ، تصور صورة فضائية ثلاثية الأبعاد منتصبة ، ولها خصائص التأثير المجسم القوي ، والتصوير الواضح والواسع ، ومسافة العمل الطويلة (عادة 110 مم) وعرض التكبير المستمر. غالبًا ما تستخدم في علم الأحياء للمراقبة في الوقت الفعلي أثناء التشريح

مصدر الضوء لمجهر ضوئي عادي هو ضوء موازٍ ، لذا فهو يشكل صورة مستوية ثنائية الأبعاد ؛ بينما يعتمد مجهر الاستريو مسارًا ضوئيًا ثنائي القناة ، ويكون للشعاع الأيسر والأيمن في الأنبوب المجهر زاوية رؤية معينة (بشكل عام 12 درجة 15 درجة) ، لذلك يمكن تشكيل صورة مجسمة في مساحة ثلاثية الأبعاد.

تُستخدم مجاهر الاستريو بطريقة مشابهة لمجاهر الضوء العادية ، ولكنها أكثر ملاءمة. الفرق الرئيسي بين الاثنين هو:

1. لا يلزم تحويل كائنات الفحص الخاصة بمجاهر الاستريو إلى شرائح.

2. مرحلة المجهر المجسم مثبتة مباشرة على قاعدة المرآة ، ومجهزة بألواح على الوجهين بالأبيض والأسود أو ألواح زجاجية ، ويمكن للمشغل الاختيار حسب الغرض ومتطلبات الفحص المجهري.

3. إن تصوير المجهر المجسم عمودي ، وهو مناسب لعمليات التشريح.

4. يحتوي المجهر الاستريو على عدسة موضوعية واحدة ، ويمكن تعديل تكبيره باستمرار عن طريق تدوير برغي الضبط.

مجهر مضان
يعد الفحص المجهري الفلوري أداة بصرية للبحث النوعي والكمي حول شدة التألق المنبعثة من المواد داخل الخلايا.

هناك نوعان من المواد الفلورية في الخلايا ، أحدهما يمكن أن يتألق مباشرة بعد تعرضه للإشعاع بالأشعة فوق البنفسجية ، مثل الكلوروفيل ، وما إلى ذلك ؛ لا تحتوي المواد الأخرى على هذه الخاصية ، ولكن إذا كانت ملطخة بأصباغ فلورية محددة أو أجسام مضادة فلورية ، فيمكن أن تتألق بالأشعة فوق البنفسجية. يمكن أيضا أن تتألق بعد التشعيع

مجهر مستقيمة تلألؤ بيولوجي / مجهر تلألؤ بيولوجي مقلوب

مبدأ المجهر الفلوري هو استخدام مصدر ضوء نقطي ذو كفاءة إضاءة عالية (مثل مصباح الزئبق عالي الضغط) لإصدار ضوء بطول موجي معين (مثل الضوء فوق البنفسجي 3650 أو الضوء البنفسجي الأزرق 4200) من خلال نظام المرشح كضوء إثارة لإثارة مواد الفلورسنت في العينة. بعد انبعاث وميض الألوان المختلفة ، يتم ترشيحه بواسطة مرشح حجب (أو قمع) خلف العدسة الشيئية ، ثم يتم ملاحظته من خلال تكبير العدسة العينية.

يحتوي مرشح الحجب على وظيفتين: إحداهما امتصاص ضوء الإثارة ومنع دخوله إلى العدسة حتى لا يزعج التألق ويتلف العينين ؛ والآخر هو اختيار الفلورة المحددة والسماح لها بالمرور ، مع إظهار لون الفلورسنت المحدد.

يمكن تقسيم مجاهر الإسفار إلى نوعين وفقًا لمبدأ المسار البصري:

1. مجهر انتقال الإسفار
في مجاهر التألق الأقدم ، يتم تمرير مصدر ضوء الإثارة عبر مادة العينة من خلال مكثف لإثارة التألق. الميزة هي أن التألق قوي عند التكبير المنخفض ، ولكن العيب هو أن التألق يتناقص مع زيادة التكبير. لذلك فهي مناسبة فقط لمراقبة المواد الأكبر حجمًا.

2. الفحص المجهري Epi-fluorescence
يسقط ضوء الإثارة من العدسة الشيئية نزولاً إلى سطح العينة ، أي أن نفس العدسة الموضوعية تستخدم كمكثف الإضاءة والعدسة الموضوعية لتجميع التألق.

يجب إضافة فاصل شعاع مزدوج اللون (مرآة ثنائية اللون) في المسار البصري ، والذي يشكل زاوية 45 درجة مع المحور البصري. ينعكس ضوء الإثارة على العدسة الموضوعية ويتم جمعه على العينة. يدخل ضوء الإثارة المنعكس عن سطح الانزلاق إلى العدسة الموضوعية في نفس الوقت ، ويعود إلى فاصل شعاع ثنائي اللون ، ويفصل ضوء الإثارة عن التألق ، ويتم امتصاص ضوء الإثارة المتبقي بواسطة مرشح الحجب. إذا قمت بالتغيير إلى مجموعة من مرشحات الإثارة المختلفة / فواصل شعاع ثنائية اللون / مرشحات حجب ، فيمكن تلبية احتياجات منتجات تفاعل الفلورسنت المختلفة.

ميزة هذا النوع من المجهر الفلوري هي أن إضاءة مجال الرؤية موحدة ، والتصوير واضح ، وكلما زاد التكبير ، كان التألق أقوى.

مجهر تباين الطور
مجهر تباين الطور هو مجهر يمكنه تحويل فرق الطور (أو اختلاف المسار البصري) الناتج عندما يمر الضوء عبر كائن ما إلى تغيير في السعة (شدة الضوء). يتم استخدامه بشكل أساسي لمراقبة الخلايا الحية أو أقسام الأنسجة غير الملطخة أو العينات المصبوغة التي تفتقر إلى التباين.

يمكن للعين البشرية فقط تحديد التغييرات في الطول الموجي (اللون) وسعة الضوء المرئي ، ولكن ليس تغيرات الطور. ومع ذلك ، فإن معظم العينات البيولوجية شفافة للغاية ، ولا يتغير اتساع الموجة الضوئية بشكل أساسي بعد مرورها ، ويتغير الطور فقط.

يغير مجهر تباين الطور بشكل أساسي اختلاف المسار البصري للضوء المرئي الذي يمر عبر العينة إلى اختلاف في السعة ، وبالتالي يحسن التباين بين الهياكل المختلفة ويجعل الهياكل المختلفة مرئية بوضوح. ينكسر الضوء بعد المرور عبر العينة ، وينحرف عن المسار البصري الأصلي ، ويتأخر بمقدار 1/4 درجة (الطول الموجي) في نفس الوقت. إذا تم زيادته أو إنقاصه بمقدار 1/4 درجة ، يصبح فرق المسار البصري 1/2 درجة ، ويتداخل الشعاعتان بعد المحور البصري لتقوية السعة أو زيادتها أو تقليلها ، وتحسين التباين.

من الناحية الهيكلية ، تختلف مجاهر تباين الطور عن المجاهر الضوئية العادية في:
1. يحتوي الحجاب الحاجز الحلقي على غشاء بفتحة حلقية ، والذي يتم تثبيته بين مصدر الضوء والمكثف. وتتمثل الوظيفة في جعل الضوء الذي يمر عبر المكثف يشكل مخروطًا ضوئيًا مجوفًا والتركيز على العينة.

2. لوحة الطور يضيف مجهر تباين الطور لوحة طور مغلفة بفلوريد المغنيسيوم داخل العدسة الشيئية لتأخير طور الضوء المباشر أو الضوء المنكسر بمقدار 1/4 درجة. هناك منطقتان على لوحة الطور ، الجزء الذي يمر الضوء المباشر من خلاله يسمى "السطح المترافق" ، والجزء الذي يمر الضوء المنعرج من خلاله يسمى "سطح التعويض". تنقسم ألواح الطور إلى نوعين وفقًا لتأثيرات عملها:

(1) لوح طور زائد: يتأخر الضوء المباشر بمقدار 1/4 درجة مئوية ، وتتراكب موجات الضوء بعد أن تتحد مجموعتا موجات الضوء لزيادة السعة ، وتكون بنية العينة أكثر إشراقًا من الوسط المحيط ، وتشكل تباين ساطع (أو تباين سلبي).

(2) B زائد لوحة الطور: تأخر الضوء المنكسر بمقدار 1/4 درجة ، ويتم طرح موجات الضوء لمجموعتي الضوء بعد محاذاة المحور ، وتصبح السعة أصغر. تكون بنية العينة أغمق من الوسط المحيط بها ، وتشكل تباينًا داكنًا (أو تباينًا إيجابيًا). تسمى العدسة الشيئية ذات لوحة الطور بالعدسة الشيئية ذات التباين الطوري ، والتي يتم تمييزها غالبًا بـ "Ph" على غلاف العدسة الشيئية.