الاستخدام السليم لمجهر الإسفار المقلوب
مجهر مضان مقلوب هو مجهر متعدد الوظائف يستخدم في مجال أبحاث العلوم البيولوجية المتطورة. هيكلها معقد ومكلف. لذلك ، حتى يتمكن طلاب الدراسات العليا في الطب من استيعاب العملية بشكل صحيح واستخدام مجهر التألق المقلوب ، يجب على المعلمين أولاً إثبات التشغيل الفعلي لمجهر التألق المقلوب. قبل ذلك ، تم إعداد دورة لتعلم المعرفة الأساسية لمجاهر الفلورة المقلوبة ، وإدخال الهيكل والمبدأ والوظيفة وطرق الاستخدام الأساسية لمجاهر الفلورة المقلوبة ، ثم في العملية المحددة ، لعينات مختلفة ، إظهار وظائف مختلفة ، من الضحلة إلى العمق ، بشكل تدريجي لتوحيد استخدام المجاهر الفلورية المقلوبة من قبل طلاب الدراسات العليا في الطب.
1. الاستخدام الصحيح للمراقبة الميدانية الساطعة. إحدى وظائف المجهر الفلوري المقلوب هي مراقبة المجال الساطع. المبدأ الأساسي هو أنه بعد تشعيع العينة بالضوء ، يختلف امتصاص الضوء لكل جزء لتحقيق التصوير في خلفية ساطعة. وهي مناسبة بشكل أساسي للخلايا الملونة أو الملونة ، ومراقبة العينات مثل أقسام الأنسجة.
2. الاستخدام الصحيح لملاحظة تباين الطور. الوظيفة الثانية لمجهر التألق المقلوب هي مراقبة تباين الطور. مبدأها الأساسي هو تحويل اختلاف المسار البصري لأجزاء مختلفة من العينة إلى فرق السعة. تتحقق الملاحظة من خلال عدسة موضوعية ذات تباين طوري مع لوحة طور وعدسة مكثفة مع الحجاب الحاجز الدائري. ينطبق بشكل أساسي على مراقبة الخلايا الحية أو أقسام الأنسجة غير الملوثة ، في عملية التدريس التجريبي ، بالإضافة إلى توجيه طلاب الدراسات العليا في الطب بشكل صحيح لمراقبة طرق التشغيل الأساسية لملاحظة تباين الطور ، من المهم توجيههم إلى فهم وإتقان العينات المستخدمة لملاحظة تباين الطور. بالنسبة لهم ، تعتبر الملاحظة المجهرية للخلايا المستنبتة هي الأكثر استخدامًا في البحث العلمي في المستقبل. بادئ ذي بدء ، لاختيار معدات الخلايا ، يوصى عمومًا باستخدام أطباق الثقافة الزجاجية والبلاستيكية وألواح الثقافة وزجاجات الثقافة. معظمها عديم اللون وشفاف ، ويمكن ملاحظتها مباشرة على مجهر الفلورسنت المقلوب دون سكب سائل الخلية والعلاجات الأخرى. ثانيًا ، أثناء الملاحظة المجهرية ، لا تفتح غطاء الجهاز حسب الرغبة ، حتى لا تلوث الخلايا. أخيرًا ، بالنسبة للمشغلين ، يحتاجون إلى ارتداء القفازات والأقنعة والمعاطف البيضاء ، والتي لا يمكن أن تحمي صحتهم فحسب ، بل تمنع أيضًا تلوث الخلايا.
3. الاستخدام الصحيح للمراقبة الفلورية. الوظيفة الثالثة لمجهر الفلورة المقلوبة هي مراقبة الفلورة. المبدأ الأساسي هو استخدام ضوء الإثارة لإثارة العينة لتوليد الفلورة ، وذلك لتحقيق مراقبة شكل العينة وموضعها. إنها مناسبة بشكل أساسي لمراقبة العينات ذات العلامات الفلورية. تعد ملاحظة الإسفار وظيفة مهمة لمجهر الفلورة المقلوب ، وملحقاته باهظة الثمن وذات استخدام خاص. من أجل أن يفهم طلاب الدراسات العليا في الطب بشكل صحيح عملية واستخدام مراقبة التألق ، لا ينبغي للمدرسين فقط تعليمهم طرق التشغيل الأساسية ، ولكن الأهم من ذلك ، تعليمهم إتقان خصوصيتها. بادئ ذي بدء ، عند تحضير العينات ، يجب أن يكون للزجاج المنزلق وزجاج الغطاء سطح أملس وسمك مناسب (يجب أن يكون زجاج الشريحة بين 0. 8 مم و 1.2 مم ، ويجب أن يكون زجاج الغطاء حوالي 0. {5}}. 17 ملم) ؛ يجب أن يكون للعينة سمك مناسب وتجنب تداخل الخلايا أو إخفاءها بالشوائب ؛ يجب أن يستخدم وسيط التركيب خليطًا متساوي الحجم من محلول الجلسرين والكربونات (0. 5 مول / لتر pH9. 0-9. 5). ثانيًا ، قبل ملاحظة الفلورسنت ، يجب إطفاء الضوء الكهربائي في الغرفة والضوء الأبيض لمجهر الفلورسنت المقلوب لضمان البيئة في غرفة مظلمة. أخيرًا ، في ملاحظة التألق ، يجب التحكم في وقت المراقبة بشكل صارم ، وعمومًا 1-2 ساعة / وقت مناسب ، وإلا فإن التألق سيضعف ويختفي ؛ عند ضبط مصدر الضوء ، قم بارتداء نظارات واقية لتجنب تلف الأشعة فوق البنفسجية للنظارات.
4. الاستخدام الصحيح لالتقاط الصور. في البحث العلمي ، ليس مطلوبًا فقط أن يتمكن مجهر الفلورة المقلوب من تحقيق ملاحظات مختلفة ، ولكنه يتطلب أيضًا أن يتمكن مجهر التألق المقلوب من تحقيق التقاط الصور. يجمع نظام المجهر الفلوري المقلوب بين مجهر ضوئي وجهاز كمبيوتر من خلال التحويل الكهروضوئي ، ليس فقط للمراقبة المجهرية على العدسة ، ولكن أيضًا لمراقبة الصور الديناميكية في الوقت الفعلي والتحرير والحفظ على الكمبيوتر.
