طرق تحضير العينات المجهرية الضوئية والإلكترونية
تشتمل طرق التحضير المجهري عمومًا على أربع فئات: طريقة التقسيم، وطريقة التثبيت الكامل، وطريقة المسح، وطريقة الأقراص.
①طريقة التقطيع. يتراوح سمك شريحة المجهر الضوئي بين 2 و 25 ميكرون. بشكل عام، يكون سمك الشريحة حوالي 10 ميكرون للمواد الحيوانية والنباتية مناسبًا. تختلف طرق التقسيم تبعاً لوسيلة التضمين. تُستخدم بشكل شائع طريقة تقسيم البارافين، وطريقة تقسيم غروانية القطن، وطريقة التقسيم المجمد، وطريقة ميثاكريلات جلايكول الإيثيلين (يشار إليها بطريقة GMA). تتضمن طريقة تقطيع البارافين خطوات مثل التثبيت والتضمين والتقسيم والتلطيخ والجفاف والتركيب. المفتاح هو تضمين المادة البيولوجية في البارافين، واستخدام البارافين كدعم، وقطع المادة البيولوجية المغمورة في كتلة الشمع إلى شرائح رقيقة مثالية. عملية التشغيل هي: التثبيت ← الغسيل بالماء ← تجفيف الكحول خطوة بخطوة من التركيز المنخفض إلى التركيز العالي ← شفافية الزيلين ← غمس الشمع ← التضمين ← التقسيم ← التصحيح ← إزالة شمع الزيلين ← معالجة الكحول خطوة بخطوة من التركيز العالي إلى التركيز المنخفض. أخيرًا، ينتقل إلى الماء ← الصباغة ← التجفيف التدريجي من التركيز المنخفض إلى التركيز العالي للكحول ← شفافية الزيلين ← ختم الغراء الراتنجي. الخطوات الأساسية هي نفسها في جميع تقنيات الإنتاج.
②طريقة الختم المتكاملة. طريقة تحضير كاملة التركيب للخلايا المفردة أو الكائنات الحية الدقيقة أو الأعضاء المتفرقة. تتطلب هذه الطريقة أيضًا خطوات مختلفة للتثبيت، والتلطيخ، والجفاف، والشفافية، والتركيب. تستخدم هذه الطريقة لتحضير أجزاء الفم والحشرات.
③طريقة تشويه. طريقة تحضير يتم من خلالها نشر العينات البيولوجية المشتتة بسهولة على شريحة زجاجية. مسحة الدم هي أحد الأمثلة.
④طريقة الضغط على الجهاز اللوحي. ضع الأنسجة الطبيعية والمنتشرة بسهولة أو الأنسجة التي تتشتت بسهولة بعد المعالجة، مثل الخلايا المنوية الحيوانية وخلايا طرف الجذر، على شريحة زجاجية، وأضف شريحة غطاء، واسحق الأنسجة بقوة لتكوين الخلايا أو الخلايا داخل الهيكل. تنتشر في طبقة واحدة من طريقة الإنتاج. غالبًا ما تُستخدم طريقة الضغط لمراقبة الكروموسومات، وعادةً ما تكون ملطخة بخلات أرجوانية، وأحمر حزازي، وفوشين كربولي.
