مقياس الأس الهيدروجيني - تحديد وتعديل متوسط الأس الهيدروجيني
تتأثر جميع الكائنات الحية الدقيقة بدرجة حموضة البيئة التي تعيش فيها. غالبًا ما يؤدي وجود الأنواع الانتقائية إلى تضييق نطاق الأس الهيدروجيني الذي تنمو فيه. في بعض الأحيان ، يمكن أن تعمل الحموضة أو القلوية في الوسط أيضًا كعامل اختيار للنمو. بالنسبة لوسائط الاختبار البيوكيميائية ، ومع ذلك ، فإن نطاق الأس الهيدروجيني الذي تظهر فيه الكائنات الحية الدقيقة نشاط tk في الركيزة يكون أضيق من نطاق الأس الهيدروجيني المطلوب للنمو: لذلك ، من المهم ضبط درجة الحموضة للوسائط إلى النطاق المتوقع. عندما يقوم المختبر بإعداد الوسيط وفقًا للتركيب المتوسط ، يجب فحص الأس الهيدروجيني وتعديله. وتجدر الإشارة إلى أنه حتى بالنسبة للوسط المجفف الصناعي الجاهز الذي توفره الشركة المصنعة (خاصة بالنسبة لبعض المواد المجففة للمخزون) ، يجب قياس الرقم الهيدروجيني النهائي بعد عمل الوسيط التجريبي.
الطريقة الأكثر دقة لقياس الأس الهيدروجيني للوسيط هي باستخدام مقياس الأس الهيدروجيني. قبل الاستخدام ، يجب معايرته بمحلول عازل قياسي من الرقم الهيدروجيني المعروف (عادة ما يكون الرقم الهيدروجيني من 4 إلى 7). اشطف قطب مقياس الأس الهيدروجيني بالماء المقطر واغمره في وسط الاستزراع في الدورق ، ثم اقرأ الرقم الهيدروجيني لوسط الاستزراع من مقياس مقياس الأس الهيدروجيني. يقدم كل مصنع تعليمات تشغيل مفصلة لكل نوع من أجهزة قياس الأس الهيدروجيني.
عند تحضير وسط الاستزراع ، يمكن تعديل PH بسهولة باستخدام مقياس الأس الهيدروجيني مع التحريك الميكانيكي. يجب تحضير وسط الاستزراع في وعاء (مثل دورق كبير) يمكن تحريكه باستمرار. أو مغناطيس ملفوف بالتفلون. يجب تعديل الرقم الهيدروجيني للوسيط المحتوي على أجار بعد الذوبان ، والذي يتم بسهولة باستخدام محرك مغناطيسي قابل للتسخين. عند ضبط الأس الهيدروجيني ، استخدم محلولًا عازلًا قياسيًا للأس الهيدروجيني المعروف لمعايرة مقياس الأس الهيدروجيني أولاً. ثم ضع القطب المركب ومقياس حرارة المقاومة (إن وجد) في الوسط ، وأضف ببطء كمية مناسبة من حمض الهيدروكلوريك وهيدروكسيد الصوديوم من نهاية الدورق بعيدًا عن القطب ، بحيث يمكن للوسيط الوصول والحفاظ على الرقم الهيدروجيني المطلوب.
يجب أن يأخذ تعويض درجة الحرارة لمقياس الأس الهيدروجيني في الاعتبار تأثير درجة الحرارة على نظام الإلكترود: في بعض التخفيفات والوسائط ، يتغير الأس الهيدروجيني بشكل كبير مع درجة الحرارة. بالنسبة للوسائط السائلة والتخفيفات ، يمكن عادةً تعديل الأس الهيدروجيني وقياسه إما عند 25 درجة أو عند درجة الحرارة التي يتم استخدامها عندها.
يجب تعديل الأس الهيدروجيني لوسط الأجار بعد الذوبان ، وتكون درجة حرارة الذوبان أعلى من 45 درجة: لذلك ، يجب تحديد الرقم الهيدروجيني للوسط الصلب عند درجة حرارة استخدامه. في هذا الوقت ، يجب استخدام قطب كهربائي مركب مسطح الرأس ، ويجب معايرة تعويض درجة الحرارة لمقياس الأس الهيدروجيني يدويًا. عند تحضير وسط الاستزراع ، إذا تم تحديد أن الأس الهيدروجيني لوسط الثقافة يختلف بين حالة الانصهار وحالة التصلب ، فهذا يعني أن هناك خطأ في ضبط الأس الهيدروجيني.
وبالمثل ، عندما يتم تعقيم الوسيط المحضر بالحرارة (على سبيل المثال ، التعقيم بالبخار المضغوط) ، فإنه قد يخضع أيضًا لتغييرات في درجة الحموضة. بالنسبة للوسط المجفف ، أخذت الشركة المصنعة ذلك في الاعتبار ، وعادة لا تكون هناك حاجة لضبط الأس الهيدروجيني ، ولكن يجب فحص الأس الهيدروجيني للوسيط المستخدم بعناية. إذا كان يجب تعديل الرقم الهيدروجيني لوسط الأجار المجفف أثناء إعادة الذوبان أو التحضير ، فمن الأفضل تعديله باستخدام حمض الهيدروكلوريك المعقم بالفلتر ومحلول هيدروكسيد الصوديوم بعد خطوة التعقيم لتجنب تكوين سخونة زائدة للوسط. عند تحضير الوسائط بمواد خام أو مستحضرات صيدلانية مختلفة ، يجب فحص الأس الهيدروجيني للوسائط بعد التعقيم. بالإضافة إلى ذلك ، إذا وجد أن الرقم الهيدروجيني للوسط يتغير بنفس الطريقة بعد كل أوتوكلاف ، فيمكن تعديل الأس الهيدروجيني بشكل مناسب عند تحضير الوسيط. ومع ذلك ، لا يزال من الضروري تحديد الرقم الهيدروجيني النهائي للوسيط بعد التعقيم.
