التصوير المجهري الفصول الدراسية 丨 مجهر وايدفيلد مضان
في تطبيقات التصوير بالخلايا الحية ، يسهل الفحص المجهري لـ widefield الفلورية مراقبة ديناميكيات الخلايا الملتصقة التي تزرع في غرف بيئية محددة موضوعة على مرحلة المجهر. في أبسط تكويناته ، يترافق مجهر زراعة الأنسجة المقلوب القياسي والمجهز بإضاءة مضان EPI مع نظام كاشف مجموعة المنطقة (عادةً كاميرا CCD) ، ومرشحات الفلورة المناسبة ، ونظام مصراع للحد من التعرض المفرط للخلايا لضوء الإثارة الضار . يعتمد الفحص المجهري الأساسي على مرشحات التداخل المتطابقة بعناية لتحديد نطاقات ترددي محددة للإضاءة واكتشاف الضوء المنبعث. تشمل مصادر الضوء الزئبق ، والزينون ، ومصابيح القوس الهاليد المعدني ، وأنظمة ليزر توسيع الشعاع ، والصمامات الثنائية الباعثة للضوء (LED) ، وكلها تتطلب مواصفات مرشح مختلفة. الفلوروفورات الاصطناعية المستخدمة في الفحص المجهري الفلوري لها أطياف انبعاث تغطي المناطق القريبة من الأشعة فوق البنفسجية والمرئية والقريبة من الأشعة تحت الحمراء. أدى استخدام البروتينات الفلورية المشفرة وراثيًا إلى توسيع قدرات الفحص المجهري الفلوري في تصوير الخلايا الحية ، مما سمح للباحثين باستهداف المناطق دون الخلوية ذات الاهتمام بدقة.
Nuohai LS 18 ، نوع جديد من مجهر إضاءة الصفائح الضوئية تم تطويره بشكل مستقل بواسطة Nuohai ، وهو مصمم خصيصًا للتصوير ثلاثي الأبعاد عالي الدقة لعينات الأنسجة الكبيرة الشفافة ، وهو مخصص لاستكشاف الأنسجة السليمة المختلفة مثل المخ والطحال والأمعاء الدقيقة والكلى والرئة والقلب والورم. هيكل دقيق ثلاثي الأبعاد للأعضاء.
في مجال التألق العريض ، يعمل انبعاث الفتحة الكاملة الذي تم جمعه بواسطة هدف المجهر على زيادة الإشارة المسجلة إلى الحد الأقصى مع تقليل وقت التعرض المطلوب. وبالتالي ، يمكن تصوير العينات بفترات ضوئية قصيرة جدًا. العيب الرئيسي للتصوير على نطاق واسع هو أن التألق من مناطق بعيدة عن المستوى البؤري ، وكذلك إشارة الخلفية ، هو ضوء غير مرغوب فيه غالبًا ما يحجب ميزات الاهتمام. لذلك ، ينتج عن التصوير الواسع النطاق أفضل النتائج عندما تكون ميزات الاهتمام كبيرة (مثل العضيات) أو شديدة الدقة في الطبيعة. مجموعة متنوعة من عينات الخلايا الحية ، بما في ذلك الخلايا الملتصقة ، والبكتيريا ، والخميرة ، وأقسام الأنسجة الرقيقة جدًا ، هي مرشحة مثالية للتصوير الفلوري واسع النطاق ، ومع ذلك ، فإن الأنسجة السميكة (أكثر من 5 ميكرون) تُستخدم بشكل أفضل مع طريقة التصوير الأكثر تقدمًا.
على الرغم من حدوث العديد من التطورات في التصوير الفلوري باستخدام الأصباغ الفلورية الاصطناعية ، والنقاط الكمومية ، والبروتينات الفلورية ، فمن المفيد في بعض الحالات الجمع بين التألق وطرائق التصوير الأخرى. كمثال ، يمكن استخدام مدينة دبي للإنترنت بالاقتران مع مضان widefield لمراقبة قابلية الخلية للتكوين والتشكل العام أثناء دراسة الظواهر ذات الأهمية لأهداف محددة محددة. عادةً ما يكون الحصول على مدينة دبي للإنترنت والتألق في صورة واحدة غير عملي ، ولكن في المجهر الذي تم تكوينه بشكل صحيح ، يمكن استخدام التقنيتين بالتتابع. وهكذا ، بعد التصوير في وضع epifluorescence ، يمكن الحصول على صور مدينة دبي للإنترنت من العينات ذات العلامات الفلورية باستخدام الضوء المنقول. يمكن دمج الصورتين أثناء التحليل اللاحق. يمكن الحصول في وقت واحد على صور مدينة دبي للإنترنت وصور التألق في تكوينات مجهر المجال الواسع المتقدمة باستخدام الإضاءة المنفصلة طيفيًا (مثل الأشعة تحت الحمراء المرئية والقريبة) والكاميرا المزدوجة أو محولات الكاميرا المنقسمة. في معظم المجاهر البؤرية المسح بالليزر ، يمكن الحصول على الصور في وضعي التألق ومدينة دبي للإنترنت في وقت واحد ، مما يلغي الحاجة إلى معالجة ما بعد الاستحواذ. يمكن أيضًا استخدام تباين الطور وتباين تعديل هوفمان جنبًا إلى جنب مع الفحص المجهري واسع النطاق. ومع ذلك ، في هذه التقنيات ، تكون العدسة الموضوعية خاصة ، سواء كانت حلقة طور أو لوحة تعديل هوفمان ، فإنها ستسبب فقدان كثافة الانبعاث بنسبة 5-15 بالمائة.
رابط المقالة: شبكة معدات الأجهزة https://www.instrumentsinfo.com/technology/show-1123.html
