طريقة العد المباشر بالمجهر الميكروبي
الخطوات التجريبية (طريقة العد المباشر بالمجهر الميكروبي)
1. التخفيف
تمييع تعليق الخميرة بشكل مناسب. إذا لم يكن المحلول البكتيري مركزا، فليس من الضروري تخفيفه.
2. غرفة الفحص المجهري والعد
قبل إضافة العينات، قم بإجراء فحص مجهري لغرفة العد بلوحة العد. إذا كان هناك أوساخ، فيجب تنظيفها قبل العد.
3. إضافة عينات
قم بتغطية لوحة عد خلايا الدم النظيفة والجافة بغطاء زجاجي، ثم استخدم قطارة معقمة ذات فم رفيع لإسقاط قطرة صغيرة (ليس كثيرًا) من محلول الخميرة المخفف من حافة زجاج الغطاء. السماح للمحلول البكتيري بالدخول إلى غرفة العد على طول الفجوة عن طريق تخلل الشعيرات الدموية. بشكل عام، يمكن ملء غرفة العد بمحلول بكتيري. يجب الحرص على عدم توليد الفقاعات.
4. العد المجهري
بعد الراحة لمدة 5 دقائق، ضع لوحة عد خلايا الدم على مسرح المجهر، واستخدم أولاً مجهرًا منخفض الطاقة لتحديد موقع غرفة العد، ثم قم بالتبديل إلى مجهر عالي الطاقة للعد. إذا وجد أن المحلول البكتيري سميك جدًا أو رقيق جدًا قبل العد، فيجب تعديل التخفيف مرة أخرى قبل العد. متطلبات تخفيف العينة العامة هي أنه يجب أن يكون هناك ما يقرب من 5-10 أجسام بكتيرية لكل خلية صغيرة. حدد 5 خلايا من كل غرفة عد (4 زوايا وخلايا مركزية اختيارية) للعد. بشكل عام، يتم احتساب الفطريات الموجودة على خط الشبكة فقط على الخطوط العلوية والأيمن. إذا نبتت الخميرة ووصل حجم البرعم إلى نصف الخلية الأم يتم أخذ عددين بكتيريين. لحساب عينة، يجب حساب المحتوى البكتيري للعينة بناءً على القيم التي تم الحصول عليها من غرفتي العد.
5. قم بتنظيف لوحة عد خلايا الدم
بعد الاستخدام، اشطف لوحة عد خلايا الدم بعمود الماء الموجود على صنبور الماء. لا تستخدم الأشياء الصلبة لغسله. بعد الغسيل، جففيه بالهواء بنفسك أو جففيه بمجفف الشعر. الفحص المجهري، لاحظ ما إذا كانت هناك أجسام بكتيرية متبقية أو رواسب أخرى في كل خلية صغيرة. وإذا لم يكن نظيفاً فيجب غسله مراراً حتى يصبح نظيفاً.
