طرق تحضير العينات للفحص المجهري الضوئي والإلكتروني للأفلام
تشتمل طريقة الميكروفيلم عمومًا على أربع فئات: طريقة التقسيم، وطريقة الختم الشاملة، وطريقة الطلاء، وطريقة الضغط.
①طريقة الشريحة. سمك شريحة المجهر الضوئي يتراوح بين 2 إلى 25 ميكرون، والمواد النباتية والحيوانية العامة، ويبلغ سمك الشريحة حوالي 10 ميكرون مناسب. تختلف طريقة التقسيم وفقًا لعوامل التضمين المختلفة. تُستخدم بشكل شائع طريقة تقطيع البارافين، وطريقة تقطيع غراء القطن، وطريقة القطع المجمدة، وطريقة ميثاكريلات جليكول (يشار إليها بطريقة GMA). تتضمن طريقة تقطيع البارافين خطوات التثبيت والتضمين والتقسيم والتلطيخ والجفاف والختم. المفتاح هو دمج المادة الحيوية في شمع البارافين، واستخدام شمع البارافين كدعم لتقطيع المادة الحيوية المغمورة في كتلة الشمع إلى شرائح رقيقة مثالية. عملية التشغيل هي كما يلي: التثبيت ← غسل الماء ← خطوة بخطوة من تجفيف الكحول بتركيز منخفض إلى عالي التركيز ← شفافية الزيلين ← غمر الشمع ← التضمين ← التقسيم ← الترقيع ← إزالة شمع الزيلين ← خطوة بخطوة من التركيز العالي إلى التركيز المنخفض معالجة الكحول، وأخيرًا الانتقال إلى الماء ← الصبغ ← خطوة بخطوة من تجفيف الكحول بتركيز منخفض إلى عالي التركيز ← شفافية الزيلين ← الختم بمادة لاصقة راتنجية. الخطوات الأساسية المتبعة هي نفسها في جميع أنواع تقنيات صناعة الأفلام.
② طريقة الختم المتكاملة. يستخدم للخلايا المفردة أو الكائنات الحية الصغيرة أو الأعضاء المتفرقة بطريقة الفيلم المثبت بالكامل. تتطلب هذه الطريقة أيضًا خطوات مختلفة للتثبيت، والتلطيخ، والجفاف، والشفافية، والختم. تستخدم هذه الطريقة لتحضير أجزاء فم الأجنحة والحشرات.
طريقة تشويه. طريقة تحضير يتم فيها تغليف عينة بيولوجية سهلة الانتشار على شريحة. مسحة الدم مثال على ذلك.
④طريقة الضغط. الأنسجة الطبيعية المشتتة بسهولة أو الأنسجة المشتتة بسهولة بعد العلاج، مثل الخلايا المنوية الحيوانية، وخلايا طرف الجذر، وما إلى ذلك على الشريحة، بالإضافة إلى ساترة، ثم سحق الأنسجة بقوة، بحيث تنتشر الخلايا أو الهياكل داخل الخلايا في طبقة من طرق التصوير . غالبًا ما تُستخدم طريقة الضغط لمراقبة الكروموسومات، وعادةً ما تكون ملطخة بخلات أرجواني، وأحمر الحزاز، وحمض الكربوليك الأحمر.
