المعرفة حول مجهر الإسفار متحد البؤر
المبدأ الأساسي للفحص المجهري متحد البؤر: يتم استخدام مصدر ضوء نقطي لإشعاع العينة ، ويتم تشكيل بقعة ضوئية صغيرة محددة جيدًا على المستوى البؤري. تتكون من مقسمات. يرسل مقسم الحزمة الفلورة مباشرة إلى الكاشف. يوجد ثقب أمام مصدر الضوء والكاشف ، يسمى على التوالي ثقب الإضاءة وثقب الكشف. الحجم الهندسي للاثنين هو نفسه ، حوالي 100-200 نانومتر ؛ بالنسبة إلى بقعة الضوء على المستوى البؤري ، فإن الاثنين مترافقان ، أي أن بقعة الضوء تمر عبر سلسلة من العدسات ، وأخيراً يمكن التركيز على ثقب الإضاءة وثقب الكشف في نفس الوقت. بهذه الطريقة ، يمكن أن يتقارب الضوء من المستوى البؤري في نطاق فتحة الكشف ، بينما يتم حظر الضوء المتناثر من أعلى أو أسفل المستوى البؤري خارج فتحة الكشف ولا يمكن تصويره. يقوم الليزر بمسح نقطة العينة بنقطة ، ويحصل الأنبوب المضاعف الضوئي بعد اكتشاف الثقب أيضًا على الصورة البؤرية لنقطة الضوء المقابلة نقطة بنقطة ، والتي يتم تحويلها إلى إشارة رقمية ونقلها إلى الكمبيوتر ، وفي النهاية يتم تجميعها في شكل واضح. صورة متحد البؤر للمستوى البؤري بأكمله على الشاشة.
كل صورة مستوى بؤري هي في الواقع مقطع عرضي بصري للعينة ، وهذا المقطع العرضي البصري دائمًا ما يكون له سمك معين ، يُعرف أيضًا باسم المقطع البصري الرفيع. نظرًا لأن شدة الضوء عند النقطة البؤرية أكبر بكثير من تلك الموجودة في نقطة عدم التركيز ، ويتم ترشيح ضوء المستوى غير البؤري بواسطة الثقب ، فإن عمق مجال النظام البؤري يكون صفرًا تقريبًا ، والمسح الضوئي على طول Z -يمكن للمحور أن يحقق التصوير المقطعي البصري ، ويشكل مراقبة القسم البصري ثنائي الأبعاد في البقعة المركزة للعينة. من خلال الجمع بين مسح المستوى XY (المستوى البؤري) ومسح المحور Z (المحور البصري) ، يمكن الحصول على الصورة ثلاثية الأبعاد للعينة من خلال تجميع صور ثنائية الأبعاد للطبقات المستمرة ومعالجتها بواسطة برنامج كمبيوتر خاص.
