كيفية قراءة نتائج الفحص المجهري الفلوري باستخدام النفق للكشف عن موت الخلايا المبرمج
1. انتبه إلى ثلاث نقاط في ملاحظة النتائج، وهي طريقة الإسقاط الفوقي، وإسقاط الدقة، ومعالجة المرشح. خاصة:
عادة ما تكون طريقة الإضاءة منظارية، أي أنه يتم تسليط مصدر الضوء على العينة من خلال العدسة الشيئية؛
مصدر الضوء هو الأشعة فوق البنفسجية، والطول الموجي أقصر، والدقة أعلى من المجاهر العادية؛
هناك نوعان من المرشحات الخاصة، يتم استخدام المرشح الموجود أمام مصدر الضوء لتصفية الضوء المرئي، ويتم استخدام المرشح الموجود بين العدسة والعدسة الشيئية لتصفية الأشعة فوق البنفسجية لحماية عيون الإنسان.
ثانيًا، المجهر الفلوري المستخدم لقياس موت الخلايا المبرمج بواسطة النفق هو أيضًا نوع من المجهر الضوئي، والفرق الرئيسي هو أن أطوال موجية الإثارة مختلفة. وهذا ما يحدد الفرق بين المجهر الفلوري والمجهر الضوئي العادي من حيث البنية والاستخدام. المجهر الفلوري هو أداة أساسية في الكيمياء الخلوية المناعية. وهي تتألف من المكونات الرئيسية مثل مصدر الضوء، نظام لوحة الترشيح والنظام البصري. إنه استخدام طول موجي معين من الضوء لإثارة العينة لإصدار مضان، ومراقبة صورة مضان العينة عن طريق تضخيم العدسة الموضوعية ونظام العدسة.
3. لوحة الترشيح المكبوتة الفلورة لقياس موت الخلايا المبرمج في النفق. تتمثل وظيفة لوحة الترشيح المكبوتة في منع مرور ضوء الإثارة تمامًا وتوفير التألق في نطاق الطول الموجي المقابل. وفقًا للوحة مرشح الإثارة، يتم استخدام الأنواع الثلاثة التالية من ألواح الترشيح المضغوطة بشكل شائع:
لوحة ترشيح الضغط على الأشعة فوق البنفسجية: يمكنها تمرير الضوء المرئي ومنع الأشعة فوق البنفسجية من المرور. يمكن دمجه مع UG-1 أو UG-5. GG-3K430 أو GG-6K460 شائع الاستخدام.
لوحة مرشح قمع الضوء الأزرق البنفسجي: يمكنها تمرير الضوء بطول موجي أعلى من 510 نانومتر (من الأخضر إلى الأحمر)، ويمكن دمجها مع BG-12. عادةً ما يتم استخدام OG-4K510 أو OG-1K530.
لوحة ترشيح ضغط الضوء فوق البنفسجي: يمكنها تمرير ضوء بطول موجي أعلى من 460 نانومتر (أزرق إلى أحمر)، ويمكن دمجها مع BG-3، شائع الاستخدام OG-11K470AK 490, K510.
