كيف تختار بين مجهر مقلوب ومجهر مضان؟
في زراعة الخلايا والتجارب المشتقة ذات الصلة ، يعتبر المجهر أداة مهمة للغاية. في الوقت الحاضر ، هناك أنواع مختلفة من المجاهر في السوق. إنه تحدٍ لاختيار مجهر يلبي الاحتياجات وقابل للتطبيق. فيما يلي مقدمة لمبادئ المجاهر المقلوبة والمجاهر الفلورية ، بحيث يمكنك الاختيار بسهولة.
تكوين المجهر المقلوب هو نفس تركيب المجهر العادي ، بما في ذلك بشكل أساسي ثلاثة أجزاء: الجزء الميكانيكي وجزء الإضاءة والجزء البصري. تكوين المجهر المقلوب هو نفس تكوين المجهر العمودي العادي ، باستثناء أن العدسة الموضوعية ونظام الإضاءة معكوسان ، الأول تحت المسرح ، والأخير فوق المرحلة. يمكن لمثل هذا الهيكل أن يوسع بشكل كبير المسافة الفعالة بين نظام تركيز الإضاءة والمرحلة ، وهو مناسب لوضع أشياء أكثر سمكًا ليتم ملاحظتها ، مثل أطباق الثقافة وزجاجات زراعة الخلايا (بالطبع ، تتوفر أيضًا الشرائح الزجاجية ، وما إلى ذلك) ، وفي الوقت نفسه ، المسافة بين العدسة الشيئية والمادة لا يجب أن تكون مسافة العمل بينهما كبيرة جدًا. تستخدم المجاهر المقلوبة لمراقبة الكائنات الحية الدقيقة والخلايا والبكتيريا وزراعة الأنسجة والمعلقات والرواسب وما إلى ذلك في الوحدات الطبية والصحية ومؤسسات التعليم العالي ومعاهد البحث. يمكن أن تراقب باستمرار عملية التكاثر وانقسام الخلايا والبكتيريا وما إلى ذلك في وسط الاستزراع ، ويمكنها التقاط صور بأي شكل في هذه العملية. يستخدم على نطاق واسع في علم الخلايا ، وعلم الطفيليات ، وعلم الأورام ، وعلم المناعة ، والهندسة الوراثية ، وعلم الأحياء الدقيقة الصناعية ، وعلم النبات وغيرها من المجالات.
يستخدم الفحص المجهري الفلوري لدراسة امتصاص ونقل المواد في الخلايا ، وتوزيع المواد الكيميائية وتوطينها ، وما إلى ذلك. بالنسبة للكائن قيد الفحص ، هناك طريقتان لتوليد التألق: التألق الذاتي ، الذي ينبعث من الفلورة مباشرة بعد تعريضه للإشعاع فوق البنفسجي ضوء؛ بعض المواد في الخلايا ، مثل الكلوروفيل ، تنتج تألق ذاتي بعد تعريضها للأشعة فوق البنفسجية ؛ على الرغم من أن بعض المواد نفسها لا يمكن أن تتألق ، إلا أنها يمكن أن تنبعث منها أيضًا وميض ثانوي بعد تلطيخها بأصباغ الفلورسنت أو الأجسام المضادة الفلورية بعد تعرضها للإشعاع بواسطة الأشعة فوق البنفسجية. يستخدم مجهر الإسفار مصدر ضوء نقطي ذو كفاءة إضاءة عالية لإصدار ضوء بطول موجي معين (ضوء فوق بنفسجي 365 نانومتر أو ضوء أزرق أرجواني 420 نانومتر) من خلال نظام التصفية كضوء إثارة ، وبعد إثارة المواد الفلورية في العينة لإصدار وميض مختلف الألوان ، ثم تتم المراقبة من خلال تكبير العدسة الشيئية والعدسة العينية. بهذه الطريقة ، في ظل خلفية تباين قوية ، حتى لو كان التألق ضعيفًا جدًا ، فمن السهل تحديده ولديه حساسية عالية. يستخدم بشكل أساسي في البحث عن بنية الخلية ووظيفتها والتركيب الكيميائي.
تنقسم مجاهر الإسفار إلى نوع الإرسال ونوع طرد epi ، الأول أكثر بدائية والأخير أكثر تقدمًا. الهيكل الأساسي لنوعين من المجاهر الفلورية متشابه ، والفرق الرئيسي هو: الضوء المثير لنوع الإرسال يمر عبر العينة ، والعينة بأكملها تولد الفلورة ، والتي تدخل بعد ذلك العدسة الموضوعية. كلما زاد التكبير ، ضعف التألق ؛ يُسقط ضوء الإثارة من نوع epi-emission على سطح العينة ، وينتج سطح العينة مضانًا ، ويدخل التألق العدسة الشيئية مرة أخرى. كلما زاد التكبير ، كان التألق أقوى ، وهو مناسب للمراقبة عالية التكبير. تشمل المكونات الرئيسية لمجهر الفلورة مصدر ضوء مصباح زئبقي ، ولوحة مرشح إثارة ، ومرآة ثنائية اللون (نوع الحلقة) ، ولوحة مرشح مضغوطة ، ومكثف مجال مظلم (نوع ناقل الحركة) ، إلخ. بالإضافة إلى ذلك ، بسبب توليد الحرارة الشديدة لمصابيح الزئبق ، ومعظمها مزود أيضًا بمرشحات ماصة للحرارة. تحتوي بعض مجاهر الفلورة أيضًا على أهداف تباين طور وأغشية حلقية ، لذلك من الممكن ملاحظة تباين الطور. هناك أيضًا مجاهر فلورية تعتمد بنية مقلوبة ، ومجهرًا مقلوبًا آخر ، وما إلى ذلك.
بالإضافة إلى ذلك ، يمكن تجميع المجاهر المذكورة أعلاه في مجهر رقمي عن طريق تثبيت CCD ، والذي يحول الصورة المادية التي يراها المجهر إلى صورة على جهاز كمبيوتر من خلال التحويل الرقمي إلى التناظري. لذلك ، يمكننا تغيير البحث في المجال المجهري من المراقبة المجهرية التقليدية العادية إلى الاستنساخ على الشاشة ، وبالتالي تحسين كفاءة العمل.
