الفلورة المجهري المعلمات التقنية تقنيات وطرق الفحص المجهري الإسفار
المعلمات التقنية لمجهر الإسفار 1. عدسة بزاوية عريضة 2. عدسة موضوعية متلألئة 3. محول عدسات موضوعية بأربعة ثقوب 4. جهاز Epi-fluorescent أزرق (B) أخضر (G) نظام إثارة 1 0 0W مصباح زئبقي 5. آلية ضبط التركيز البؤري الخشن والدقيق المحوري: الضبط نطاق التركيز: 15 مم قيمة شبكة الحركة الدقيقة: 0.002 مم 6. طاولة ميكانيكية مزدوجة الطبقة نطاق الحركة الطولي: 70 مم نطاق الحركة الجانبي: 50 مم
المعلمات التقنية المجهر الإسفار
1. عدسة واسعة الزاوية
2. العدسة الشيئية اللونية
3. أربعة فتحة أنف
4. جهاز Epi-fluorescence الأزرق (B) الأخضر (G) الإثارة بنظام 100W مصباح الزئبق
5. آلية ضبط التركيز البؤري الدقيق والخشن المحوري: نطاق التركيز 15 مم قيمة شبكة الحركة الدقيقة 0. 002 مم
6. منضدة عمل ميكانيكية بطبقتين
نطاق الحركة العمودية: 70 مم مدى الحركة الجانبية: 50 مم
مهارات وطرق الفحص المجهري الإسفار
(1) شريحة زجاجية
يجب أن يكون سمك الشريحة الزجاجية بين 0 .8 و 1.2 مم. ستمتص الشريحة السميكة جدًا مزيدًا من الضوء من ناحية ، ومن ناحية أخرى ، لا يمكن تركيز ضوء الإثارة على العينة. يجب أن تكون الشرائح ناعمة وموحدة في السُمك وخالية من التألق الذاتي الواضح. في بعض الأحيان يتم استخدام شرائح زجاج الكوارتز.
(2) غطاء زجاجي
سماكة زجاج الغطاء حوالي 0. 17 ملم ، أملس. من أجل تقوية ضوء الإثارة ، يمكن أيضًا استخدام زجاج غطاء التداخل ، وهو غطاء زجاجي خاص مغطى بعدة طبقات من المواد (مثل فلوريد المغنيسيوم) التي لها تأثيرات تداخل مختلفة على ضوء الأطوال الموجية المختلفة ، والتي يمكن أن تجعل مضان بسلاسة. يمر الضوء المثير وينعكس ، وهذا الضوء المثير المنعكس يثير العينة.
(3) عينة
يجب ألا تكون شرائح الأنسجة أو العينات الأخرى سميكة جدًا. إذا كان سميكًا جدًا ، فسيتم استهلاك معظم ضوء الإثارة في الجزء السفلي من العينة ، في حين أن الجزء العلوي الذي تمت ملاحظته مباشرة بواسطة العدسة الشيئية لن يكون متحمسًا تمامًا. بالإضافة إلى ذلك ، يؤثر تداخل الخلية أو غطاء النجاسة على الحكم.
(4) عامل التركيب
يشيع استخدام الجلسرين كعامل تركيب ، والذي يجب ألا يكون له تألق ذاتي ، وعديم اللون وشفاف ، كما أن سطوع التألق يكون أكثر إشراقًا عند درجة الحموضة 8. 5-9. 5 ، وليس من السهل أن يتلاشى بسرعة. لذلك ، يتم استخدام خليط متساوٍ من الجلسرين و 0. 5 مول / لتر محلول منظم كربونات برقم هيدروجيني 9. 0 إلى 9.5 كعامل تركيب.
(5) زيت المرآة
بشكل عام ، عند مراقبة العينات باستخدام المجاهر الفلورية ذات المجال المظلم وعدسات الغمر بالزيت ، يجب استخدام زيت الغمر. من الأفضل استخدام زيت غمر خاص غير فلوري. يمكن أيضًا استخدام الجلسرين أعلاه بدلاً من ذلك ، ويمكن أيضًا استخدام البارافين السائل ، لكن معامل الانكسار منخفض ، مما يؤثر بشكل طفيف على جودة الصورة. تأثير.
المبدأ والخصائص الهيكلية لمجهر التألق
يستخدم الفحص المجهري الفلوري نقطة ذات كفاءة إضاءة عالية لإصدار ضوء بطول موجي معين (مثل الضوء فوق البنفسجي 3650 أو الضوء الأزرق الأرجواني 4200 بوصة) من خلال نظام المرشح كضوء الإثارة لإثارة المواد الفلورية في العينة لإصدار تألق من ألوان مختلفة بعد ذلك ، لاحظ من خلال تكبير العدسة الشيئية والعينية. بهذه الطريقة ، في ظل خلفية تباين قوية ، حتى لو كان التألق ضعيفًا جدًا ، فمن السهل تحديده ولديه حساسية عالية. يستخدم بشكل أساسي في البحث عن بنية الخلية ووظيفتها والتركيب الكيميائي. يتكون الهيكل الأساسي لمجهر التألق من مجهر بصري عادي بالإضافة إلى بعض الملحقات (مثل مصدر الضوء الفلوري ، ومرشح الإثارة ، وموزع شعاع ثنائي اللون ومرشح مانع ، إلخ). مصدر الضوء الفلوريسنت - يستخدم بشكل عام مصباح زئبقي عالي الضغط (50-200 W) ، والذي يمكن أن ينبعث منه ضوء بأطوال موجية مختلفة ، ولكن كل مادة فلورية لها طول موجة إثارة ينتج أقوى وميض ، لذلك مرشح الإثارة (بشكل عام ، هناك مرشحات إثارة للأشعة فوق البنفسجية والأرجوانية والأزرق والأخضر) ، والتي تسمح فقط لضوء الإثارة بطول موجي معين بالمرور عبر العينة وإشعاعها ، بينما تمتص الضوء الآخر. بعد أن يتم تشعيع كل مادة بضوء الإثارة ، فإنها تصدر وميضًا مرئيًا بطول موجة أطول من الطول الموجي للإشعاع في وقت قصير جدًا. الإسفار محدد وهو أضعف عمومًا من ضوء الإثارة. من أجل مراقبة تألق معين ، يجب إضافة الحجب (أو الكبت) خلف العدسة الموضوعية واستخدامها جنبًا إلى جنب معها.
الفرق بين المجهر الفلوري والمجهر العادي
1. عادة ما تكون طريقة الإضاءة أسقفية ، أي أن مصدر الضوء يُسقط على العينة من خلال العدسة الموضوعية ؛
2. مصدر الضوء هو ضوء فوق بنفسجي ، الطول الموجي أقصر ، ودقة الوضوح أعلى من المجاهر العادية.
3. هناك نوعان من الفلاتر الخاصة ، المرشح الموجود أمام مصدر الضوء يستخدم لتصفية الضوء المرئي ، والمرشح الموجود بين العدسة والعدسة الموضوعية يستخدم لتصفية الأشعة فوق البنفسجية لحماية العين البشرية.
مجهر الإسفار هو أيضًا نوع من المجهر الضوئي ، والفرق الرئيسي هو أن الطول الموجي للإثارة مختلف. هذا يحدد الفرق بين مجهر التألق والمجهر البصري العادي من حيث التركيب والاستخدام.
يعد الفحص المجهري الفلوري أداة أساسية في الكيمياء الخلوية المناعية. وهي تتألف من مكونات رئيسية مثل مصدر الضوء ونظام لوحة المرشح والنظام البصري. هو استخدام طول موجي معين من الضوء لإثارة العينة لإصدار التألق ، ومراقبة صورة التألق للعينة عن طريق تضخيم العدسة الموضوعية ونظام العدسة.
