الإجراء التجريبي لطريقة العد المجهري المباشر الميكروبيولوجي
1. التخفيف
تعليق Saccharomyces cerevisiae للتخفيف المناسب، لا يمكن تخفيف السائل البكتيري، مثل غير السميك.
2. فحص المرآة لغرفة العد
قبل إضافة العينات، يجب فحص غرفة العد بلوحة العد أولاً. إذا كان هناك أوساخ، فيجب تنظيفها قبل العد.
3. إضافة العينة
صفيحة الهيماتوكريت نظيفة وجافة مغطاة بغطاء ساترة، ثم سيتم تخفيف السحاحة المعقمة ذات الفم الناعم بسائل خميرة البيرة من حافة قطرات الغطاء (لا ينبغي أن يكون كثيرًا)، بحيث يتسرب السائل البكتيري على طول الفجوة عن طريق التسلل الشعري إلى غرفة العد، يمكن ملء غرفة العد العامة بالسائل البكتيري. لاحظ أنه لا ينبغي أن يكون هناك فقاعات الهواء.
4. العد المجهري
بعد الراحة لمدة 5 دقائق، ضع لوحة عد الدم على مرحلة حامل المجهر، وابحث أولاً عن موقع غرفة العد ذات التكبير المنخفض، ثم قم بالتغيير إلى التكبير العالي للعد. إذا وجد أن السائل البكتيري سميك جدًا أو رقيق جدًا قبل العد، فيجب إعادة تعديل التخفيف قبل العد. بشكل عام، يتطلب تخفيف العينة حوالي 5-10 من الكائنات الحية في كل خلية صغيرة. لكل غرفة عد، يتم حساب الكائنات الحية الموجودة في المقصورات الخمس الوسطى (يمكن اختيار 4 زوايا ومركز الحجرة الوسطى). عادةً ما يتم حساب البكتيريا الموجودة على خطوط الشبكة فقط على الخطوط العلوية والأيمن. في حالة تبرعم الخميرة، يتم حساب كائنين حيين إذا كان جسم التبرعم نصف حجم الخلية الأم. عد عينة من غرفتي العد لحساب القيمة لحساب المحتوى البكتيري للعينة.
5. تنظيف صفيحة الهيماتوكريت
بعد الاستخدام، لوحة عد خلايا الدم في قفص الماء مع شطف عمود الماء، لا تستخدم الأشياء الصلبة للغسل والتنظيف بالفرشاة، أو الغسيل والتجفيف أو التجفيف باستخدام مجفف الشعر. قم بفحص اللوحة مجهريا ولاحظ ما إذا كان هناك أي كائنات متبقية أو رواسب أخرى في كل حجرة صغيرة. وإذا لم يكن نظيفاً فيجب إعادة الغسل حتى يصبح نظيفاً.
