المبادئ التجريبية لطريقة العد المباشر للمجهر الميكروبي
يعد العد المباشر تحت المجهر باستخدام مقياس الكريات طريقة شائعة الاستخدام لحساب الكائنات الحية الدقيقة. وميزة هذه الطريقة هي أنها بديهية وسريعة. ضع المعلق البكتيري المخفف بشكل مناسب (أو معلق البوغ) في غرفة العد بين الشريحة وساترة مقياس الهيموكيتومتر، وقم بالعد تحت المجهر. نظرًا لأن حجم غرفة العد ثابت (0.1 مم2)، فيمكن تحويله إلى العدد الإجمالي للكائنات الحية الدقيقة لكل وحدة حجم بناءً على عدد الكائنات الحية الدقيقة التي تمت ملاحظتها تحت المجهر. وبما أن هذه الطريقة تحسب العدد الإجمالي للبكتيريا الحية والميتة، فإنها تسمى أيضًا طريقة العد البكتيري الإجمالي.
عادةً ما يكون مقياس الكريات الدموية عبارة عن شريحة خاصة بها أربع فتحات تشكل ثلاث منصات. تنقسم المنصة الوسطى إلى نصفين بواسطة أخدود أفقي قصير. توجد شبكة مربعة محفورة على المنصة من كل جانب. وتنقسم كل شبكة مربعة إلى تسعة مربعات كبيرة. المربع الكبير في المنتصف هو غرفة العد. يتم عد الكائنات الحية الدقيقة في غرفة العد. يظهر هيكل مقياس الكريات في الشكل Ⅷ-1.
حجم غرفة العد عموما له نوعان من المواصفات. أحدهما عبارة عن مربع كبير مقسم إلى 16 مربعًا متوسطًا، وكل مربع متوسط مقسم إلى 25 مربعًا صغيرًا (الشكل Ⅷ-2)؛ والآخر مربع كبير. تنقسم الشبكة المربعة إلى 25 مربعًا متوسطًا، وينقسم كل مربع متوسط إلى 16 مربعًا صغيرًا (الشكل الثامن-1, C). لكن بغض النظر عن نوع لوحة العد، فإن عدد المربعات الصغيرة في كل مربع كبير هو نفسه، أي 16×25=400 مربع صغير، كما هو موضح في الشكل Ⅷ-2.
يبلغ طول ضلع كل مربع كبير 1 مم، وبالتالي تكون مساحة كل مربع كبير 1 مم 2. بعد تغطية زجاج الغطاء، يكون الارتفاع بين الشريحة وزجاج الغطاء 0.1mm، وبالتالي يكون حجم غرفة العد 0.1mm3.
عند العد، قم عادةً بحساب العدد الإجمالي للبكتيريا في خمسة مربعات متوسطة، ثم أوجد متوسط قيمة كل مربع وسط، ثم اضرب في 16 أو 25 للحصول على العدد الإجمالي للبكتيريا في مربع كبير، ثم احسب التحويل إلى العدد الإجمالي للبكتيريا في 1 مل من المحلول البكتيري.
