الفرق بين المجهر الفلوري والمجهر الضوئي العادي
يختلف المجهر الفلوري والمجهر الضوئي العادي، ويختلف المجهر الفلوري والمجهر الضوئي العادي، فليس من خلال إضاءة مصدر الضوء العادي لمراقبة العينة، ولكن باستخدام طول موجي معين من الضوء (عادةً الأشعة فوق البنفسجية والأزرق البنفسجي) إثارة العينة تحت المجهر داخل مادة الفلورسنت، بحيث ينبعث منها ضوء الفلورسنت، وبالتالي فإن دور المجهر الفلوري في مصدر الضوء ليس إضاءة مباشرة، ولكن كنوع من تحفيز عينات الفلورسنت الداخلي للضوء. مصدر المجهر الفلوري ليس إضاءة مباشرة، ولكن كمصدر للطاقة لتحفيز مادة الفلورسنت داخل العينة. السبب وراء تمكننا من ملاحظة العينة لا يرجع إلى إضاءة مصدر الضوء، ولكن ظاهرة التألق التي تظهرها مادة الفلورسنت في العينة بعد امتصاص الطاقة الضوئية المثارة. يمكن ملاحظة أن خصائص المجهر الفلوري تتمثل أساسًا في أن مصدر الضوء الخاص به يمكن أن يوفر عددًا كبيرًا من نطاق الطول الموجي المحدد لضوء الإثارة، بحيث يمكن للمواد الفلورية الموجودة داخل العينة التي تم فحصها الحصول على الكثافة اللازمة لضوء الإثارة. وفي الوقت نفسه، يجب أن يكون لدى المجهر الفلوري نظام ترشيح مطابق. المجهر الفلوري هو الأداة الأساسية للكيمياء النسيجية الفلورية. وهو يتألف من مصدر ضوء عالي الضغط ونظام مرشح (بما في ذلك لوحة مرشح الإثارة والقمع) والنظام البصري ونظام التصوير الفوتوغرافي والمكونات الرئيسية الأخرى، وهو استخدام طول موجي معين من الضوء لتحفيز العينة لإصدار مضان.
1. طريقة إثارة الفلورسنت: وفقًا لنطاق الطول الموجي للضوء، يتم تقسيمها إلى طريقة إثارة الأشعة فوق البنفسجية (باستخدام الإضاءة فوق البنفسجية) وطريقة إثارة BV (باستخدام الضوء البنفسجي الأزرق) نوعان من طريقة إثارة الأشعة فوق البنفسجية أقصر من 400 نانومتر بالقرب من الأشعة فوق البنفسجية الإثارة. لا يوجد أي ضوء إثارة مرئي في هذه الطريقة، لذلك يُظهر الفلورسنت المرصود الفلورسنت المتأصل للصبغة، ومن السهل التمييز بين الفلورسنت المحدد في العينة والفلورسينس الذاتي لأنسجة الخلفية.
2. طريقة الإثارة BV: تتمحور الطريقة على 404 نانومتر، 434 نانومتر من الأشعة فوق البنفسجية إلى الضوء الأزرق للإثارة. تستخدم هذه الطريقة الضوء الأزرق لتشعيع العينة، لذلك يجب أن يستخدم مرشح القطع لنظام مراقبة الفلورسنت مرشحًا يمكنه حجب الضوء الأزرق تمامًا وتمرير الفلورسنت الأخضر والأصفر المطلوب بشكل كامل. أصباغ الفلورسنت لطريقة الأجسام المضادة الفلورية. نظرًا لأن الطول الموجي للحد الأقصى لامتصاص ضوء الإثارة والطول الموجي للحد الأقصى لانبعاث الفلورسنت قريبان من بعضهما البعض، فإن المرشحات المستخدمة في طريقة الإثارة BV يجب أن تكون مرشحات مقطوعة حادة. تستخدم هذه الطريقة الضوء الأزرق كضوء إثارة، وبالتالي تكون كفاءة امتصاص الفلوروكروم أعلى ويمكن الحصول على صورة أكثر سطوعًا. العيب هو أنه لا يمكن رؤية التألق تحت 500 نانومتر، وتظهر الصورة بأكملها باللون الأصفر فوق 500 نانومتر. في طريقة الأجسام المضادة الفلورية، يتم الحكم على معظم النوعية من خلال اللون الفريد للفلوروكروم، وبالتالي فإن عيوب طريقة إثارة BV الموصوفة أعلاه تميل إلى أن تكون مؤثرة للغاية عند مناقشة الخصوصية الدقيقة.
