تحديد عدد الكائنات الحية الدقيقة – طريقة العد المباشر المجهري!
أساسي
طريقة العد المباشر المجهري هي طريقة بسيطة وسريعة وبديهية لوضع كمية صغيرة من معلق العينة المراد اختبارها على شريحة زجاجية خاصة (المعروفة أيضًا باسم عداد البكتيريا) ذات مساحة وحجم محددين، والعد مباشرة أسفلها. مجهر. في الوقت الحاضر، تشتمل عدادات البكتيريا الشائعة الاستخدام في الداخل والخارج على: لوحة عد خلايا الدم، وعداد بكتيريا Peteroff-Hauser، وعداد بكتيريا Hawksley، وما إلى ذلك. ويمكن استخدامها جميعًا لحساب المعلقات مثل الخميرة والبكتيريا وجراثيم العفن، و المبادئ الأساسية هي نفسها. يبلغ إجمالي حجم عدادي البكتيريا الأخيرين 0.02 مم 3 بعد تغطيتهما بغطاء زجاجي، وتكون المسافة بين زجاج الغطاء والشريحة 0.02 مم فقط، لذا فإن الخلايا الصغيرة مثل يمكن ملاحظة البكتيريا وحسابها باستخدام عدسة موضوعية مغمورة بالزيت. بالإضافة إلى استخدام عدادات البكتيريا هذه، هناك أيضًا طريقة تقدير للمراقبة المباشرة لنسبة مساحة اللطاخة إلى مساحة المجال البصري تحت المجهر. تستخدم هذه الطريقة بشكل عام للفحص البكتريولوجي للحليب. تتمثل ميزة طريقة العد المباشر للمجهر في أنها بديهية وسريعة وسهلة التشغيل. لكن عيب هذه الطريقة هو أن النتائج المقاسة عادة ما تكون مجموع البكتيريا الميتة والحية. في الوقت الحاضر، هناك بعض الطرق للتغلب على هذا القصور، مثل الجمع بين البكتيريا الحية التي تصبغ ثقافة الغرفة الدقيقة (وقت قصير) وإضافة مثبطات انقسام الخلايا لتحقيق غرض عد البكتيريا الحية فقط.
في هذه التجربة، تم استخدام مقياس الهيموكيتومتر كمثال لإجراء العد المباشر تحت المجهر. لمعرفة طرق استخدام عدادي البكتيريا الآخرين، يرجى الرجوع إلى تعليمات كل مصنع. يعد العد المباشر تحت المجهر باستخدام مقياس الكريات طريقة شائعة الاستخدام للعد الميكروبي. لوحة العد عبارة عن شريحة زجاجية مصنوعة خصيصًا، حيث تشكل أربع فتحات ثلاث منصات؛ وتنقسم المنصة الأوسع في المنتصف إلى نصفين بواسطة فتحة أفقية قصيرة، وكل جانب من المنصة مبطن بشبكة. وتنقسم كل شبكة إلى تسعة مربعات كبيرة، والمربع الكبير الأوسط هو غرفة العد. يحتوي حجم غرفة العد بشكل عام على خاصيتين، أحدهما هو أن المربع الكبير مقسم إلى 25 مربعًا متوسطًا، وكل مربع متوسط مقسم إلى 16 مربعًا صغيرًا؛ والآخر هو أن المربع الكبير مقسم إلى 16 مربعًا وسطًا، وكل مربع وسط مقسم إلى 25 مربعًا صغيرًا، ولكن بغض النظر عن نوع لوحة العد، يوجد 400 مربعات صغيرة في كل مربع كبير. يبلغ طول ضلع كل مربع كبير 1 مم، ثم تكون مساحة كل مربع كبير 1 مم2. وبعد تغطية زجاج الغطاء يكون الارتفاع بين زجاج الغطاء وزجاج الشريحة 0.1 مم، وبالتالي يكون حجم الزجاج غرفة العد 0.1 ملم (واحد من عشرة آلاف من الملليلتر).
