مزايا وعيوب الفحص المجهري الماسح بالليزر Multiphoton
يعد الفحص المجهري للمسح الضوئي بالليزر Multiphoton طريقة تجريبية تعتمد على تقنية الفحص المجهري بالليزر ، والتي توفر قدرات تقسيم بصرية أكثر دقة في الملاحظة ثلاثية الأبعاد. تستخدم طريقة الإثارة متعددة الفوتون ضوءًا أحمر طويل الموجة أو ضوءًا قريبًا من الأشعة تحت الحمراء لجمع صور مضان عالية الدقة للعينات ، والتي لها حد أدنى من الضرر للعينات الحية ، لذا فهي مناسبة لتصوير الخلايا الحية ، خاصة للأنسجة الحية السميكة مثل شرائح المخ والأجنة ودراسات التصوير لأعضاء كاملة أو حتى كائنات حية كاملة.
المزايا هي كما يلي:
1. بسبب الضوء الأحمر أو ضوء الأشعة تحت الحمراء ، يكون تشتت الضوء صغيرًا (تشتت الجسيمات الصغيرة يتناسب عكسًا مع القوة الرابعة للطول الموجي).
2. ليست هناك حاجة للثقوب ، ويمكن جمع المزيد من الفوتونات المتناثرة من قسم التصوير.
3. لا يمكن للثقب تمييز الفوتونات المتناثرة المنبعثة من منطقة البؤرة أو منطقة التركيز ، كما أن نسبة الإشارة إلى الضوضاء للتصوير متعدد الفوتونات في الطبقات العميقة جيدة.
4. الضوء فوق البنفسجي أو المرئي المستخدم لإثارة الفوتون المفرد يتم امتصاصه وتخفيفه بسهولة بواسطة العينة قبل أن تصل الحزمة إلى المستوى البؤري ، وليس من السهل إثارة الطبقات العميقة.
5. فيما يتعلق بالمراقبة البيولوجية المجهرية ، فإن الاعتبار الأول هو عدم الإضرار بالحالة النشطة للكائن الحي نفسه ، والحفاظ على دوران الماء ، وتركيز الأيونات ، والأكسجين والمواد المغذية. في حالة مراقبة الضوء ، يجب أن تظل كل من الحرارة وطاقة الفوتون ضمن كمية الإشعاع والطاقة الضوئية التي لن تتلف الخلايا.
6. الفحص المجهري Multiphoton له أيضا العديد من المزايا. مثل الدقة ثلاثية الأبعاد ، والاختراق العميق ، وكفاءة التشتت ، وضوء الخلفية ، ونسبة الإشارة إلى الضوضاء ، والتحكم ، وما إلى ذلك ، هناك خصائص متفوقة لم تكن مجاهر الليزر تمتلكها أو لا تضاهى في الماضي.
تم توسيع الفحص المجهري للمسح الضوئي بالليزر متعدد الفوتون متحد البؤر ليشمل مختلف مجالات البحث والتطبيق. يمكنه إجراء مراقبة ثلاثية الأبعاد غير مدمرة للعينات في الحالة الطبيعية ، ويمكنه تحسين الدقة ونسبة الإشارة إلى الضوضاء للنظام. باستخدام مواد الإثارة متعددة الفوتون ، يمكنه أيضًا تحقيق تخزين بيانات الارتفاع ثلاثي الأبعاد والتصنيع الدقيق للاتجاه التعسفي ثلاثي الأبعاد ، والذي يتميز بقيمة تطبيق عالية. من المعتقد أنه مع التطوير الإضافي للآلات والمواد وتكنولوجيا الليزر المتعلقة بالفحص المجهري متعدد البؤر ، سيكون هناك المزيد من مجهر المسح الضوئي بالليزر متحد البؤر للفوتون سيحصل على تطوير أكبر وتطبيق أوسع.
العيوب هي كما يلي:
1. فقط للتصوير الفلوري.
2. إذا كانت العينة تحتوي على حاملات صبغية يمكنها امتصاص ضوء الإثارة ، مثل الأصباغ ، فقد تتضرر العينة حراريًا.
3. يتم تقليل الدقة بشكل طفيف. على الرغم من أنه يمكن تحسينها باستخدام الفتحة (كنفوكل) في نفس الوقت ، ستفقد الإشارة.
4. نظرًا لمحدودية أجهزة الليزر فائقة السرعة باهظة الثمن ، فإن تكلفة مجهر المسح متعدد الفوتونات مرتفعة نسبيًا.
